[发明专利]一种蔗糖磷酸化酶的固定化方法有效
| 申请号： | 201811517830.6 | 申请日： | 2018-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN109371006B | 公开（公告）日： | 2021-12-14 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;吴丹;宿玲恰;王淼淼 | 申请（专利权）人： | 江南大学（如皋）食品生物技术研究所;江南大学 |
| 主分类号： | C12N11/089 | 分类号： | C12N11/089;C12N9/10;C12P19/18;C12P19/12 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 226599 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶的固定化方法，属于生物工程技术领域。本发明以重组枯草芽孢杆菌SPase/pBSMuL3作为生产菌株，LX‑1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为7.75U/g，酶活回收率达到110.85％；LX‑1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为9.54U/g，酶活回收率达到101.82％。在相同的转化时间内，以0.5M蔗糖和0.5M葡萄糖为底物连续操作11次，氨基化树脂LX‑1000EA固定化SPase保持39.15％的转化率，94％的残留酶活；氨基化树脂LX‑1000HA固定化SPase保持42.5％的转化率，91％的残留酶活。结果表明，该固定化方法操作简单，固定化酶酶活没有损失，且应用效果很好，具有很高的工业化应用潜力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蔗糖 磷酸化酶 固定 方法 | ||
【主权项】：
1.一种固定化蔗糖磷酸化酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)以氨基化树脂LX‑1000EA或LX‑1000HA为固定化载体，加入缓冲液后，在一定的温度下震荡，静置过滤后加到戊二醛溶液中，继续在同样的温度下震荡，洗去残留的戊二醛，过滤得到处理后的氨基化树脂LX‑1000EA或LX‑1000HA；(2)在步骤(1)处理后的氨基化树脂LX‑1000EA或LX‑1000HA中加入蔗糖磷酸化酶，震荡固定，得到的LX‑1000EA固定化SPase或LX‑1000HA固定化SPase。
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