[发明专利]一种检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及生物传感器技术领域，特别涉及基于滚环扩增介导催化发夹自组装和内切酶反馈放大方法检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器。该发明的检测方式是荧光法检测，利用荧光仪。在检测之前，先将挂锁探针和连接探针形成环形模板探针。然后将目标物加入到复合探针I、复合探针II和HP2、HP3的均相溶液，在37℃孵育120 min，目标物与适配体序列绑定。在phi29 DNA聚合酶和核酸内切酶IV作用下完成多倍数反馈放大过程，从而实现信号的放大。然后用荧光仪设置激发波长为399 nm，检测610 nm处荧光强度，检测范围为560 nm‑640 nm。同时本发明还提供了该生物传感器的制备方法，该方法反应条件温和，易于操作。

主权项

1.一种检测赭曲霉毒素A的荧光生物传感器，其特征在于，包括OTA适配体、目标物、复合探针I、复合探针II、HP2、HP3、phi29 DNA 聚合酶、核酸内切酶IV、dNTP以及缓冲液；所述复合探针I为OTA适配体、拱形探针与环形模板杂交而成；所述复合探针II为环形模板与HP1杂交而成；所述的环形模板探针由挂锁探针与连接探针形成；所述的挂锁探针序列如SEQ No.1所示；所述的连接探针序列如SEQ No.2所示；所述的OTA适配体序列如SEQ No.3所示；所述的拱形探针序列如SEQ No.4所示所述的HP1序列如SEQ No.5所示；所述的HP2序列如SEQ No.6所示；所述的HP3序列如SEQ No.7所示。