[发明专利]一种基于多胞嘧啶的核酸适配体检测可卡因的方法

摘要

本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种基于多胞嘧啶的核酸适配体检测可卡因的方法。本发明使用多胞嘧啶修饰可卡因核酸适配体并荧光标记，氧化石墨烯对修饰后的可卡因核酸适配体进行物理性吸附，吐温20去除GO表面对可卡因的吸附，以此来检测可卡因；加入吐温20后荧光恢复明显优于没有加入吐温20时，利用GO吸附具有Poly‑C的可卡因适配体，无需额外化学修饰DNA，还能有效固定DNA进行淬灭，poly‑C修饰的可卡因适配体能有效降低合成成本，方法简单、快速准确且灵敏性高。

主权项

1.一种基于多胞嘧啶的核酸适配体检测可卡因的方法，其特征在于，所述方法包括步骤如下：（1）使用Poly‑C以及羧基荧光素对可卡因核酸适配体进行修饰和荧光标记，加入到磷酸缓冲盐溶液中配置成Poly‑C可卡因核酸适配体的PBS缓冲液；（2）加入氧化石墨烯对Poly‑C修饰及荧光标记后的可卡因核酸适配体的DNA进行淬灭，得到Poly‑C‑GO可卡因核酸适配体；（4）吐温20修饰后的Poly‑C‑GO可卡因核酸适配体中加入不同浓度可卡因标准溶液，进行荧光恢复，并测量在520nm处加入可卡因后的荧光强度F；（5）计算加入可卡因前后的荧光增长率F/F₀–1，以可卡因标准溶液浓度为横坐标，以荧光增长率为纵坐标，得到可卡因浓度的标准曲线；（6）将待测可卡因样本按照步骤（1）‑步骤（4）的方法获得加入待测可卡因后的荧光强度值F'，代入到步骤（5）得到的标准曲线中，获得待测可卡因样本的浓度。