[发明专利]一种生物酶法合成D-苹果酸的方法有效
| 申请号： | 201811562095.0 | 申请日： | 2018-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN109402184B | 公开（公告）日： | 2022-04-22 |
| 发明（设计）人： | 李晚军;王苓;伍万兵;陈纹锐;张丽 | 申请（专利权）人： | 四川同晟生物医药有限公司 |
| 主分类号： | C12P7/46 | 分类号： | C12P7/46 |
| 代理公司： | 成都弘毅天承知识产权代理有限公司 51230 | 代理人： | 白小明 |
| 地址： | 618000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种生物酶法合成D‑苹果酸的方法，属于有机酸制备领域，具体涉及一种用大肠杆菌工程菌全细胞酶法制备D‑苹果酸的方法。本发明利用基因工程手段在大肠杆菌Rosetta(DE3)菌中共表达了马来酸水合酶的大小亚基，通过生物发酵获得过表达马来酸水合酶的菌体，全细胞生物酶法转化马来酸合成D‑苹果酸，产量为200.17g/L，转化率高达99.97％。本发明构建基因工程菌培养条件简单，发酵周期短，发酵成本低，易于实现菌体高密度发酵，菌体收率高，底物转化率高，有利于生物酶法合成D‑苹果酸的产业化大规模生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 生物酶 合成 苹果酸 方法 | ||
【主权项】：
1.一种生物酶法合成D‑苹果酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：A.利用大肠杆菌Rosetta(DE3)作为宿主菌，共表达来源于产碱假单胞菌的马来酸水合酶的大小亚基PaHbzI和PaHbzJ，获得共表达马来酸水合酶大小亚基PaHbzI和PaHbzJ的大肠杆菌工程菌pETDuet‑PahbzI‑PahbzJ/Rosetta(DE3)，即DHIJ工程菌；B.通过生物发酵DHIJ工程菌获得大量表达马来酸水合酶大小亚基的湿菌体，再利用湿菌体全细胞转化马来酸合成D‑苹果酸。
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