[发明专利]一种鸡传染性支气管炎病毒含量的测定方法在审
申请号: | 201811565822.9 | 申请日: | 2018-12-20 |
公开(公告)号: | CN109554504A | 公开(公告)日: | 2019-04-02 |
发明(设计)人: | 李守军;张立霞;郁宏伟;康亚男;陈冰;唐荣宏;高华义 | 申请(专利权)人: | 天津瑞普生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/93 |
代理公司: | 天津合正知识产权代理有限公司 12229 | 代理人: | 陈松 |
地址: | 300308 天津市滨海*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明提供了一种鸡传染性支气管炎病毒含量的检测方法,该方法使用荧光定量PCR法来检测病毒的含量,并结合荧光定量PCR的标准曲线来确定鸡胚的感染情况判定EID50。本方法可针对鸡胚被感染后无临床症状或症状不明显的病毒进行定量检测,克服了传统EID50无法准确客观测定不能引起临床病变的病毒含量的不足。 | ||
搜索关键词: | 传染性支气管炎病毒 荧光定量PCR 病毒 鸡胚 种鸡 标准曲线 定量检测 方法使用 客观测定 临床症状 感染 检测 判定 病变 | ||
【主权项】:
1.一种鸡传染性支气管炎病毒(IBV)含量测定方法,具体包含如下实验步骤:1)10倍系列稀释IBV,将不同稀释倍数的IBV分别接种10~11日龄鸡胚;2)将接种后的鸡胚继续孵育48‑60h,分别收获尿囊液并提取RNA;3)用荧光定量PCR法测定RNA中IBV的含量,并结合荧光定量PCR的标准曲线判定各受试鸡胚的IBV感染情况;4)根据受试鸡胚的感染情况,计算EID50。
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