[发明专利]一种木蝴蝶配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法及其应用

摘要

本发明公开了一种木蝴蝶配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法及其应用，包括步骤：对照品溶液的制备、供试品溶液的制备、超高相液相色谱测定、特征图谱的建立、相似度评价等。本发明建立了木蝴蝶配方颗粒的UPLC特征图谱，并通过液质联用技术对木蝴蝶配方颗粒6种共有成分进行了快速定性及定量分析。该方法为木蝴蝶配方颗粒的质量评价和控制提供了较为全面、系统、有效的快速评价方法。

主权项

1.一种木蝴蝶配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：（a）混合对照品溶液的制备：分别精密称取白杨素、黄芩素、白杨素‑7‑O‑β‑D葡萄糖醛酸苷、木蝴蝶A、黄芩苷和木蝴蝶B对照品，加甲醇溶解定容至25mL，即得白杨素、黄芩素、白杨素‑7‑O‑β‑D葡萄糖醛酸苷、木蝴蝶A、黄芩苷、木蝴蝶B浓度分别为12.594μg/mL、69.600μg/mL、32.286μg/mL、128.256μg/mL、31.512μg/mL、60.276μg/mL的混合对照品储备液，即得；（b）供试品溶液的制备：取木蝴蝶配方颗粒，研细，取0.1g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入60‑80%乙醇50‑100mL，称定重量，超声处理15‑30分钟，取出，放冷，用60‑80%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤膜滤过，即得；（c）超高相液相色谱测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1µl，注入超高效液相色谱仪，测定，记录色谱图，其中色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为276nm，流速为0.28mL/min，进样体积为1μL，柱温为30℃；（d）特征图谱的建立：将多批木蝴蝶配方颗粒的色谱图，采用“中药色谱特征图谱相似度评价系统”进行数据匹配，建立木蝴蝶配方颗粒的特征图谱，确定具有6个共有峰，以1号峰为参照峰S，各特征峰的相对保留时间分别为：峰1：1.00、峰2：1.20、峰3：1.22、峰4：1.35、峰5：1.52、峰6：1.68，相对保留时间在规定值的±10%之内；（e）相似度评价：计算各批次木蝴蝶配方颗粒的相似度，木蝴蝶配方颗粒的相似度均大于0.90。