[发明专利]一种利用UPLC特征图谱鉴别百部药材基源的方法

摘要

本发明公开了一种利用UPLC特征图谱鉴别百部药材基源的方法，本发明先建立百部药材的特征图谱，通过对比分析，确定了鉴别百部药材基源的依据，该方法简单，重现性良好，准确可靠，UPLC的线性梯度洗脱的条件简单，便于操作，可用于百部药材基源的鉴别，为临床原料的控制提供了依据。

主权项

1.一种利用UPLC特征图谱鉴别百部药材基源的方法，其特征在于，包括如下步骤：(a) 供试品溶液的制备：分别取对叶百部药材和直立百部药材，研细，取0.25g，精密称定，置10ml量瓶中，加入50‑100%甲醇适量，超声处理10‑30分钟，取出，放冷，用50‑100%甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，即得；(b) 参照物溶液的制备：取绿原酸对照品适量，加80%甲醇制成每1ml含绿原酸20µg，即得；分别再取对叶百部对照药材、直立百部对照药材0.5g，精密称定，置20ml量瓶中，加入80%甲醇适量，超声处理30min，取出，放冷，用80%甲醇定容至刻度，摇匀，用0.22um滤膜滤过，即得；(c) 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸为流动相B，按下表进行梯度洗脱；流速：0.25ml/min；柱温为25℃；检测波长为210nm；（d）特征图谱的建立：分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各1µl，注入超高效液相色谱仪，测定，采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”匹配，建立对叶百部药材和直立百部药材的特征图谱；（e）鉴别依据：将对叶百部药材和直立百部药材的特征图谱进行比较，对叶百部药材中确定具有8个特征峰，以峰3绿原酸峰为参照峰S峰，各特征峰的相对保留时间分别为：峰1：0.82、峰2：0.95、峰3：1.00、峰4：1.04、峰5：1.18、峰6：1.48、峰7：1.52、峰8：1.67，相对保留时间在规定值的±10%之内；直立百部药材中确定具有6个色谱峰，与对叶百部药材相比，缺少峰1和峰2，将峰1和峰2作为鉴别百部药材基源的依据；（f）鉴别：将待测百部样品与对叶百部与直立百部药材的特征图谱进行比较，确定百部药材基源；若待测百部样品色谱中具有峰1和锋2，则为对叶百部；若无峰1和锋2，则为直立百部。