[发明专利]一种基于流式细胞术超高通量分离酿酒酵母单倍体的方法在审
| 申请号： | 201811580414.0 | 申请日： | 2018-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN109355245A | 公开（公告）日： | 2019-02-19 |
| 发明（设计）人： | 周景文;陈坚;曾伟主;方芳;堵国成;夏小乐;张伟平 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N3/00 | 分类号： | C12N3/00;C12R1/865 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于流式细胞术超高通量分离酿酒酵母单倍体的方法，属于高通量筛选技术领域。本发明通过优化子囊孢子处理条件，得到了酿酒酵母孢子悬液的最佳制备条件。利用PI和FDA染料分别对孢子悬液中活性孢子和失活细胞进行染色，通过基于流式细胞仪分析染色样品，实现了对酿酒酵母孢子的活性区分及孢子的绝对计数。本发明确立了最优的孢子悬液制备条件，建立了基于流式细胞仪的超高通量酿酒酵母单倍体分离技术。 | ||
| 搜索关键词： | 酿酒酵母 单倍体 通量 流式细胞术 孢子悬液 孢子 高通量筛选技术 最佳制备条件 孢子悬液制备 流式细胞仪 分离技术 活性孢子 流式细胞 染色样品 失活细胞 子囊孢子 染料 染色 优化 分析 | ||
【主权项】：
1.一种超高通量分离酵母单倍体的方法，其特征在于，基于流式细胞术进行分离，所述方法包括如下步骤：(1)采用蜗牛酶和/或玻璃珠振荡处理孢子悬液；(2)利用PI和FDA染料对步骤(1)的孢子悬液进行染色；(3)使用流式细胞仪检测孢子活性；(4)利用流式细胞仪分选有活性的孢子，直接将单个活性孢子分选到装有固体培养基的高通量孔板中。
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