[发明专利]一种饲料呕吐毒素降解微生物筛选及鉴定在审

专利信息
申请号: 201811581481.4 申请日: 2018-12-24
公开(公告)号: CN109609381A 公开(公告)日: 2019-04-12
发明(设计)人: 窦勇;胡佩红;李逸鹤;顾鹏程;董静;姚妙爱 申请(专利权)人: 江苏财经职业技术学院
主分类号: C12N1/02 分类号: C12N1/02;C12N1/20;C12Q1/04;C12R1/00
代理公司: 北京盛凡智荣知识产权代理有限公司 11616 代理人: 王勇
地址: 223001 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 一种饲料呕吐毒素降解微生物筛选及鉴定,其特征在于,包括以下步骤:(1)、从鸡肠道中筛选分离到一株江都丛毛单胞菌;(2)、把江都丛毛单胞菌经ICR小鼠急性毒性试验,确定其具有高度安全性,对人体无害;(3)、把江都丛毛单胞菌样品经无菌生理盐水适当稀释后,按10%接种量接种于含一定浓度DON的培养基中,于120r/min,30℃震荡培养。本发明具有如下优点:本发明12h内对DON的降解率为56.56%,24h降解率为91.12%,而36h内的降解效率高达96.76%该菌的成功筛选,为其他霉菌毒素菌的分离和筛选提供了可行的参考研究方法,也为DON生物降解的应用奠定基础。
搜索关键词: 丛毛单胞菌 筛选 降解微生物 呕吐毒素 降解率 急性毒性试验 无菌生理盐水 高度安全性 饲料 降解效率 霉菌毒素 筛选分离 生物降解 震荡培养 培养基 鸡肠道 接种量 稀释 接种 参考 应用 成功 研究
【主权项】:
1.一种饲料呕吐毒素降解微生物筛选及鉴定,其特征在于,包括以下步骤:(1)、从鸡肠道中筛选分离到一株江都丛毛单胞菌;(2)、把江都丛毛单胞菌经ICR小鼠急性毒性试验,确定其具有高度安全性,对人体无害;(3)、把江都丛毛单胞菌样品经无菌生理盐水适当稀释后,按10%接种量接种于含一定浓度DON的培养基中,于120r/min,30℃震荡培养;(4)、每培养7天,按10%接种量转接新鲜富集基中培养,培养基中DON终浓度依次为20~40μg/mL、40~60μg/mL、60~80μg/mL、80~100μg/mL,富集培养4次,HPLC法检测DON降解效果,获得DON降解微生物的初筛混合菌种;(5)、选取初筛中降解效果最好的样品培养液进行复筛。采用DON终浓度为40~100μg/mL的权利要求3所述固体无机盐富集培养基上,平板涂布分离DON降解菌,并连续划线接种于LB平板上,获得纯种DON降解微生物培养物,HPLC法考察单菌对DON降解效果,选择降解效率高的纯种微生物。
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