[发明专利]一种石蜡切片组织核酸的快速自动化提取方法与试剂

摘要

本发明公开了一种石蜡切片组织核酸的快速自动化提取方法与试剂，所述试剂包括脱蜡剂、蛋白酶溶液、裂解液、洗涤液A、洗涤液B和洗脱液；其方法为使用无毒的脱蜡剂快速脱蜡，乙醇洗涤后，含有SDS与尿素的蛋白酶加入裂解消化成液体，转移入自动化磁珠提取仪中提取，依次进行裂解与磁珠吸附、洗涤A、洗涤B、洗脱液，约30分钟的机内运行时间，可完成32份乃至96份样本的提取；本发明的石蜡切片组织核酸的快速自动化提取方法与试剂，在完成常规的第一次蛋白酶孵育后，将孵育溶解体系升温至高温后维持3~5分钟后取出，待其冷却至室温，再向该反应体系中加入蛋白酶，再孵育10~30分钟即可使组织完全溶解消失，无明显颗粒物，溶液清亮。

主权项

1.一种石蜡切片组织核酸的试剂，其特征在于，包括脱蜡剂、蛋白酶溶液、裂解液、洗涤液A、洗涤液B和洗脱液；所述脱蜡剂为D‑柠檬烯；所述蛋白酶溶液由5~20mg/ml蛋白酶K、0.1~0.8%SDS、0.2~9M尿素、5~200m M Tris‑HCl、0.1~10m M EDTA.Na2组成；所述裂解液由4.5M 硫氰酸胍、0.9%DTT、5%聚多卡醇、50m M柠檬酸钠缓冲液、4M尿素和0.5%SDS组成；所述洗涤液A由2M硫氰酸胍、30%乙醇、0.25%SDS和2M尿素组成；所述洗涤液B由80%乙醇、20m M氯化钠、2m MTris和0.1%Tween20组成；所述洗脱液由10m M Tris‑HCL和0.2m M EDTA组成。