[发明专利]一种同时检测四环素类、林可霉素、氟苯尼考抗生素残留量的方法

摘要

本发明公开了一种同时检测四环素类、林可霉素、氟苯尼考抗生素残留量的方法，采用间接竞争法反应原理，将四环素类、林可霉素、氟苯尼考的人工抗原以微阵列形式固定于微孔板底部，制备成微孔板生物芯片阵列，并依次与四环素类、林可霉素、氟苯尼考抗体和不同的标准品或样品反应，最后用银增强显色，并采用可视化芯片扫描仪对微孔板显色结果进行快速扫描成像，图像采用芯片分析软件处理。相比较于现有技术，本发明方法采用固定制备的人工抗原和标记抗体的方法，极大地减短了检测时间，提高了灵敏度，实验操作简单，提高了检测效率，对四环素类、林可霉素、氟苯尼考药物残留分析方法研究具有重要意义和很好的应用推广价值。

主权项

1.一种同时检测四环素类、林可霉素、氟苯尼考抗生素残留量的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制备蛋白芯片：将四环素类人工抗原、林可霉素人工抗原、氟苯尼考人工抗原在芯片载体上进行点样操作，恒温孵育固定，加入封闭剂继续恒温孵育，然后洗涤拍干；(2)特异性结合反应：取步骤(1)制备所得蛋白芯片，向所有孔板内加入四环素类抗体、林可霉素抗体和氟苯尼考抗体的混合抗体进行反应；然后向部分反应孔内加入不同浓度梯度的混合标准品，剩余反应孔内加入待检测样品；再向所有孔板内加入纳米银标记的羊抗鼠IgG，贴上盖板膜后恒温振荡孵育，孵育完成后洗涤拍干；(3)显色反应：向步骤(2)孵育后的孔板内加入纳米银增强显色液，恒温振荡孵育，然后用超纯水洗涤拍干；(4)处理分析：利用可视化生物芯片扫描仪对步骤(3)处理后的蛋白芯片进行扫描，并利用芯片分析软件进行结果处理分析。