[发明专利]以外泌体为载体的肿瘤靶向热疗材料的制备方法及其产品

摘要

本发明提供一种以外泌体为载体的肿瘤靶向热疗材料的制备方法，以肺癌细胞A549分泌的外泌体为载体，通过超高速离心法提取所述的外泌体，将合成的金纳米棒与外泌体共孵育，得到具有光热疗效对肺癌具有靶向性的纳米复合材料。本发明利用纳米金棒在近红外下所产生的光热效应，使组织升温，加速肺肿瘤细胞死亡，肺癌细胞分泌的外泌体使材料在生物体的具有良好的生物相容性及肺癌细胞靶向性，可用于肿瘤靶向热疗的材料，以有效提高热疗效果。

主权项

1.一种以外泌体为载体的肿瘤靶向热疗材料的制备方法，其特征在于以肺癌细胞A549分泌的外泌体为载体，将合成的纳米金棒与外泌体共孵育，得到具有光热疗效对肺癌细胞具有靶向性的纳米复合材料，包括以下步骤：（1）纳米金棒的制备在质量份为5~50份蒸馏水中，加入摩尔比为0.1:1的高氯酸金和表面活性剂，搅拌均匀后加入还原剂，还原剂与高氯酸金的摩尔比为1:1，继续搅拌，当溶液由深棕黄色变为无色后，加入0.1~2份的无机盐溶液，保持反应温度15~35℃，反应8~24小时后，离心、蒸馏水洗涤3次，得到尺寸均匀长径比为1.8~6的纳米金棒；（2）外泌体的提取将A549肺癌细胞在5% CO2细胞培养箱内37℃条件下培育并经多次传代，使用离心机将收集的培养液与细胞分离，取上清液在4℃条件下依次300g、2000g、10000g 离心0.5~4小时，以去除细胞与细胞碎片，再以 10000~100000 g 超速离心1~4小时达到分离、富集外泌体的目的，用磷酸缓冲液（PBS）清洗可部分去除残存蛋白质；（3）外泌体吞噬金棒将得到的外泌体加入合成的纳米金棒在一定的条件下共孵育0.5~2小时，得到所需产物。