[发明专利]采用磁珠混样处理DNA的测序文库标准化方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种采用磁珠混样处理DNA的测序文库标准化方法及试剂盒，本发明利用固定数量的磁珠捕获DNA分子，使得获取固定量的DNA分子变得容易，后续的混样中只需要按照DNA分子摩尔比例分配每个样本的上机测序数据即可，省去了前期处理的测DNA浓度，测DNA文库摩尔浓度等繁琐的步骤，大大简化了多个不同样本DNA文库上机测序前的处理过程，可以实现自动化操作，成本低，实用性强。

主权项

1.一种采用磁珠混样处理DNA的测序文库标准化方法，其步骤如下：1)消化过程：对DNA文库中的DNA分子，利用外切酶从DNA分子末端消除碱基，暴露出黏性末端；2)捕获过程：2.1)磁珠和步骤1)获得的具有黏性末端的DNA分子结合，其中磁珠为已知用量的带有DNA结合片段的磁珠，所述DNA结合片段与DNA分子黏性末端特异性结合；2.2)利用DNA聚合酶补齐黏性末端上可能存在的缺口或者切掉Flap DNA结构，再用DNA连接酶将缺刻连接起来；3)漂洗过程：将已捕获DNA分子的磁珠吸附在磁力架上，使用磁珠漂洗缓冲液洗掉未结合的DNA分子；4)混样：针对多个不同样本DNA文库，通过的重复步骤1)～3)以获得已捕获不同DNA分子的多种磁珠，并按照相同或相似的量将多种磁珠混合在一起；5)洗脱：使用DNA洗脱液和内切酶从步骤4)获得的混合的多种磁珠上洗脱DNA分子，得到可上机测序的文库样本。