[发明专利]基于Illumina测序技术检测乙型肝炎分型及多耐药位点的试剂盒及方法有效
申请号: | 201811635320.9 | 申请日: | 2018-12-29 |
公开(公告)号: | CN109609694B | 公开(公告)日: | 2022-03-01 |
发明(设计)人: | 窦同海;高春芳;王曦路;祝海军;陈雯雯;陈静;高惠芳 | 申请(专利权)人: | 上海昂朴生物科技有限公司;中国人民解放军海军军医大学第三附属医院;江苏昂朴医疗科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 上海华工专利事务所(普通合伙) 31104 | 代理人: | 赵孟琴;缪利明 |
地址: | 201114 上海市闵*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于Illumina测序技术检测乙型肝炎分型及多耐药位点的方法,包括以下步骤:A:提取HBV基因组DNA;B:对HBV基因组DNA进行扩增,获得第一扩增产物;C:使用第二、三引物对扩增第一扩增产物,得到第二、三扩增产物;D:对第二、三扩增产物进行扩增,得到测序文库;E:对测序文库进行质检定量;F:上机测序;G:数据分析得到耐药位点及分型相关信息。本发明还公开了一种基于Illumina测序技术检测乙型肝炎分型及多耐药位点的试剂盒。采用本发明的方法具有灵敏度高、针对性强、成本低、通量大,准确性高等优点,能够有效检测HBV样品的多个耐药位点突变状态,尤其在低滴度样本上具有明显优势。 | ||
搜索关键词: | 基于 illumina 技术 检测 乙型肝炎 耐药 试剂盒 方法 | ||
【主权项】:
1.一种非诊断目的的基于Illumina测序技术检测乙型肝炎分型及多耐药位点的方法,其特征在于,包括如下步骤:A:提取检测样本中的HBV基因组DNA;B:使用第一引物对,对所述HBV基因组DNA进行扩增,以得到第一扩增产物;C:使用第二引物对和第三引物对,扩增所述第一扩增产物,得到第二、三扩增产物;D:使用Illumina通用引物对对第二、三扩增产物进行扩增,得到测序文库;E:对所述测序文库进行质检定量;F:上机测序得到测序结果;G:数据分析得到耐药位点及分型相关信息,其中,第一引物对的序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示,第二引物对的序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示,第三引物对的序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。
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