[发明专利]一种检测BCR-ABL融合基因ABL激酶区突变的方法在审
| 申请号： | 201811636832.7 | 申请日： | 2018-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN109777864A | 公开（公告）日： | 2019-05-21 |
| 发明（设计）人： | 尤隽丹;郝玮;李小青 | 申请（专利权）人： | 武汉康圣达医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12N15/11;C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;陈征 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种检测BCR‑ABL融合基因ABL激酶区突变的方法。该方法采用COLD‑PCR结合二代测序的方法检测外周血或骨髓中BCR‑ABL融合基因两种剪切型M‑bcr和m‑bcr中的ABL激酶区耐药突变，即在同一体系内先扩增M‑bcr和m‑bcr的BCR‑ABL融合基因，再进行COLD‑PCR扩增ABL激酶区，并利用CLOD‑PCR的原理封闭野生型模板，利用Tc温度富集少量突变基因，同时通过二代测序的方法提高检测灵敏度。本发明方法具有操作简单、重复性好、高通量检测标本、报告时间短等特点，尤其适用于少量突变克隆株的检测。使用该方法将显著提高突变检测的敏感度及复合突变的检测能力。 | ||
| 搜索关键词： | 突变 融合基因 种检测 测序 检测 高通量检测 检测灵敏度 耐药突变 同一体系 突变基因 突变检测 剪切型 敏感度 外周血 野生型 富集 扩增 骨髓 克隆 复合 标本 封闭 | ||
【主权项】：
1.一种检测BCR‑ABL融合基因ABL激酶区突变的方法，其特征在于，从外周血或骨髓样本中提取RNA，随机引物逆转录成cDNA，再以cDNA为模板，在同一反应体系中扩增待测样品中BCR‑ABL融合基因两种剪切型M‑bcr和m‑bcr，以扩增产物为模板，COLD‑PCR扩增ABL激酶区，构建文库，文库混合制备模板后上机测序。
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