[发明专利]人血浆中游离甲氧基去甲肾上腺素与甲氧基肾上腺素的高效液相色谱串联质谱检测方法在审
| 申请号： | 201811653863.3 | 申请日： | 2018-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN109725079A | 公开（公告）日： | 2019-05-07 |
| 发明（设计）人： | 马金飞;冯加翼;康洲阳;刘华芬 | 申请（专利权）人： | 杭州凯莱谱精准医疗检测技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司： | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人： | 陈娟 |
| 地址： | 310013 浙江省杭州市余*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种血浆中游离甲氧基去甲肾上腺素与甲氧基肾上腺素的高效液相色谱串联质谱检测方法，包括如下步骤：(1)样品预处理，血浆样品依次加入内标工作液和醋酸铵溶液，涡旋混合，离心；(2)弱阳离子交换固相萃取96孔板(SPE96孔板)活化；(3)固相萃取处理，步骤(1)处理后样品上样至处理后的SPE 96孔板，甲酸乙腈溶液洗脱，洗脱液用氮气吹干；(4)复溶，高效液相色谱串联质谱法进行分析检测。本发明方法具有高准确度、高重现性、高灵敏度、高专属性、高效率、高通量、低成本、操作简便快速等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 甲氧基 肾上腺素 高效液相色谱 去甲肾上腺素 串联质谱 固相萃取 游离 高效液相色谱串联质谱法 醋酸铵溶液 样品预处理 氮气吹干 分析检测 高灵敏度 甲酸乙腈 弱阳离子 涡旋混合 血浆样品 样品上样 准确度 低成本 高通量 高效率 工作液 人血浆 洗脱液 重现性 专属性 检测 复溶 活化 孔板 内标 洗脱 血浆 交换 | ||
【主权项】：
1.人血浆中游离甲氧基去甲肾上腺素和甲氧基肾上腺素的高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样本预处理：取100～500μL人血浆，依次加入10～50μL内标工作液和0.1～1mL 50mM pH＝8醋酸铵溶液，涡旋振荡30秒，4000rpm离心5分钟；(2)取弱阳离子交换固相萃取96孔板，依次加入200μL甲醇与水淋洗，待其自然流干；(3)固相萃取过程：将步骤(1)处理后的样品转移到步骤(2)处理后的SPE96孔板上，用氮气正压装置压干，依次加入50～500μL 50mM醋酸铵溶液(pH＝8)和50～500μL乙腈进行淋洗；再加入200μL 5％甲酸乙腈溶液洗脱，用96孔接收板收集洗脱液，通25～60℃氮气直至干燥；(4)将步骤(3)得到的残渣，进一步用50～200μL复溶溶液复溶，涡旋使充分溶解，上高效液相色谱串联质谱系统进样5～50μL分析检测。
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