[发明专利]一种长链多肽的纯化方法

摘要

本发明提供了一种长链多肽的纯化方法，其包括步骤1)，即纯化步骤：采用两根色谱柱串联进行粗品的分离，其中，上游色谱柱中填料的粒径比下游色谱柱填料粒径大；可选地，还包括作为转盐的步骤2)：采用步骤1)中的上游色谱柱进行转盐，将步骤1)得到的目标峰产物进行上样；以95％‑85％的A2和5％‑15％的B冲洗15‑30min进行脱盐，其中，A2相为体积比0.05％‑0.2％的醋酸水溶液，B相为有机相乙腈，检测波长为230nm。

主权项

一种长链多肽的纯化方法，其包括如下步骤：/n1)纯化步骤：采用两根色谱柱串联进行粗品的分离；/n步骤1)色谱柱填料选自C18硅胶填料、C8硅胶填料、C4硅胶填料和聚合物填料或者同种烷基长度不同孔径的填料；上游色谱柱的长度为8-20cm；下游色谱柱的长度8-20cm；/n步骤1)流动相：A1相为缓冲盐溶液，其pH值为2-3，优选地，所述缓冲盐溶液为硫酸铵、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾中的一种或几种；B相为有机相，所述的有机相为乙腈、甲醇、异丙醇和乙醇；缓冲盐物质的量浓度为20mM-150mM，检测波长：230nm；/n步骤1)包括以梯度洗脱：A1％：95％-55％，B％：5％—45％，洗脱时间为30-120分钟；在洗脱过程中，当上游色谱柱的流出峰为杂质峰时弃去相应的流动相，当上游色谱柱的流出峰为目标峰时启动在上下游色谱柱中间设置的三通混合器所连接的色谱泵，输入纯化水，进行在线稀释，在线稀释后目标峰进入下游色谱柱；/n可选地，还包含作为转盐的步骤2)：/n步骤2)采用步骤1)中的上游色谱柱进行转盐，A2相为体积比0.05％-0.2％的醋酸水溶液；B相为有机相，所述的有机相为乙腈；检测波长：230nm；/n步骤2)包括：将步骤1)得到的目标峰产物进行上样；以95％A2和5％的B冲洗15-30min进行脱盐；/n然后以梯度洗脱进行转盐，A2％：95％-55％，B％：5％-45％，洗脱10-30min，收集目标产物。/n