[发明专利]一种卷烟烟气TVOC与小鼠肺灌洗液中TNF-α表达的相关性分析方法

摘要

本发明涉及一种卷烟烟气TVOC与小鼠肺灌洗液中TNF‑α表达的相关性分析方法，属于生物应用技术领域。该方法包括卷烟烟气抽吸、烟气稀释、小鼠暴露、TVOC浓度测定、肺部灌洗、ELISA测试、相关性分析、判断等步骤。本发明的方法操作简单，采用小动物口鼻暴露装置，最大限度的模拟人实际抽吸情况；可选择短期或者长期暴露，对烟气对肺部的生物学效应做跟踪性调查，提供较为完整的数据跟踪；且烟气暴露浓度可控，可模拟不同抽吸量对肺部所造成的影响，为烟气对肺部生物学效应影响的科学性和准确性提供保证。

主权项

1.一种卷烟烟气TVOC与小鼠肺灌洗液中TNF‑α表达的相关性分析方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤（1），卷烟烟气抽吸：每支烟抽吸持续时间2‑5s，抽吸频率30‑60s，抽吸容量35.0‑50ml/2s，抽吸口数4‑6口，得到卷烟烟气；步骤（2），烟气稀释：将步骤（1）得到的卷烟烟气与洁净空气按体积比为1:10‑1:100的配比稀释混匀，后进入口鼻式暴露系统；所述的洁净空气是空气经高效空气过滤器过滤所得；步骤（3），小鼠暴露：将小鼠束缚在固定筒中适应15‑30min后，将装有小鼠的固定筒安装在口鼻式暴露系统上，内缸正压烟气气流进入动物鼻部，呼出气流从侧面被吸入外缸，进行卷烟烟气抽吸；每日进行一次暴露过程，持续14‑28d；步骤（4），TVOC浓度测定：小鼠每天暴露后，在口鼻式暴露系统上进行采样，之后测量所采样品的TVOC浓度；步骤（5），肺部灌洗：对持续暴露14‑28d后的小鼠用1ml无菌生理盐水灌注进行肺部灌洗，灌洗液离心，取上清液；步骤（6），ELISA测试：用ELISA方法检测上清液中TNF‑α含量；步骤（7），相关性分析：对多种牌号的卷烟采用步骤（1）~步骤（6）的发方法进行试验，然后对测得的TVOC浓度与TNF‑α含量进行相关性分析；步骤（8），判断：根据步骤（7）得到的相关性分析结果，判断除步骤（7）牌号的其它待测牌号卷烟引起TNF‑α表达情况。