[发明专利]一种一步法合成L-肌肽的方法及截短的L-肌肽合成酶

摘要

本发明公开了一种一步法合成L‑肌肽的方法及截短的L‑肌肽合成酶，该方法以β‑丙氨酸、L‑组氨酸、ATP和聚磷酸盐为原料，MgCl2为激活剂，加入L‑肌肽合成酶和聚磷酸盐激酶，在pH 6.5‑8.5,30‑45℃温度条件下通过酶促反应偶联催化合成肌肽；本发明利用大肠杆菌分别表达截短的L‑肌肽合成酶(其氨基酸序列如SEQ ID No.3所示)和聚磷酸盐激酶，经纯化后混合形成双酶偶联体系，截短表达的L‑肌肽合成酶催化β‑丙氨酸和L‑组氨酸合成L‑肌肽，同时伴随着ATP去磷酸化形成ADP，聚磷酸盐激酶则催化聚磷酸盐转磷酸基团给ADP形成ATP，从而实现ATP的循环再生；利用双酶偶联体系，在合适的反应条件下反应得到肌肽；本发明的方法具有原料价格低廉、酶转化时间短、操作简便以及生产成本低等优点。

主权项

1.一种一步法合成L‑肌肽的方法，其特征在于:以β‑丙氨酸、L‑组氨酸、ATP和聚磷酸盐为原料，MgCl₂为激活剂，加入L‑肌肽合成酶和聚磷酸盐激酶，在pH 6.5‑8.5,30‑45℃温度条件下通过酶促反应偶联催化合成肌肽。