[发明专利]一种脐带血NK细胞的培养方法

摘要

本发明涉及细胞培养领域，特别涉及一种脐带血NK细胞的培养方法，包括以下步骤：由脐带血分离得到的PBMC细胞接种于包被有CD16单抗的培养容器中培养，培养体系是在VIVO‑15基础培养基的基础上添加FBS、IL‑2、IL‑12、IL‑15；培养4‑4.5天后，扩培，扩培接种于包被有CD16单抗的培养容器中培养，扩培所用的培养体系是在GT‑T581基础培养基的基础上添加FBS、IL‑2、IL‑7、IL‑12、IL‑15、IL‑21。本发明提供的脐带血NK细胞的培养方法，通过在不同的基础培养基上添加不同的组分进行初始培养和扩培，操作简便，成本低，能得到大量满足临床使用标准的NK细胞，使该方法更利于推广和应用。

主权项

1.一种脐带血NK细胞的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：由脐带血分离得到的PBMC细胞接种于包被有CD16单抗的培养容器中进行培养，培养体系是在VIVO‑15基础培养基的基础上添加以下组分：以培养体系的体积计，FBS 50±2μL/mL，IL‑2 500±10IU/mL，IL‑12 2.5±0.2ng/mL，IL‑15 20±2ng/mL；培养4‑4.5天后，进行扩培，扩培接种于包被有CD16单抗的培养容器中进行培养，扩培所用的培养体系是在GT‑T581基础培养基的基础上添加以下组分：以培养体系的体积计，FBS 50±2μL/mL，IL‑2 500±10IU/mL，IL‑7 1ng±0.1ng/mL，IL‑12 2.5±0.2ng/mL，IL‑15 50±2ng/mL，IL‑21 2ng±0.2；所述扩培次数至少一次。