[发明专利]一种免标记荧光检测基因的方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种免标记荧光检测基因的方法及试剂盒。本发明以底物探针SP结合核酸探针FS辅助目标信号级联再循环扩增策略。以G‑quadruplex为信号报告分子，可现实免标记检测基因，简化了操作，降低了成本。整个检测过程响应迅速，无需专业训练即可掌握操作流程，便于快速推广使用。本发明所述的检测方法和试剂盒，检测度灵敏高，检测限低，精密度高，特异性高。

主权项

1.一种免标记荧光检测基因的试剂盒，包括反应缓冲液、与G‑quadruplex结合后荧光发生变化的荧光染料，其特征在于：还包括核酸探针LS、SS、HS和FS，其中：核酸探针LS从5'端开始依次为I、Ⅱ和Ⅲ区域，其中I区包含链置换反应的支点序列，能通过碱基互补识别待测基因；Ⅱ区与HS核酸探针完全互补；Ⅲ区与核酸探针SS的Ⅲ^*区互补，使得核酸探针SS上的G‑quadruplex序列被绑定；核酸探针SS从5'端开始依次为Ⅲ^*和Ⅳ区域，其中Ⅲ^*区与核酸探针的Ⅲ区互补，Ⅲ^*和Ⅳ区共同构成G‑quadruplex序列；核酸探针FS从5'端开始依次为Ⅲ^*和Ⅱ^*区域，其中Ⅲ^*和Ⅱ^*区分别与核酸探针LS的Ⅲ和Ⅱ区完全互补。