[发明专利]一种葡聚糖硫酸钠联合脂多糖诱导的小鼠原代结肠粘膜上皮细胞炎症模型的建立方法有效
| 申请号： | 201910063587.3 | 申请日： | 2019-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN110343657B | 公开（公告）日： | 2021-02-19 |
| 发明（设计）人： | 郭世宁;黎增权;晁利民;陈文谦;李岳飞;吕伟杰 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 崔红丽 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种葡聚糖硫酸钠联合脂多糖诱导的小鼠原代结肠粘膜上皮细胞炎症模型的建立方法，属于细胞炎性模型技术领域。本发明首次使用葡聚糖硫酸钠联合脂多糖作为刺激物诱导处理小鼠原代结肠粘膜上皮细胞建立细胞炎症模型，且首次使用结肠粘膜上皮细胞作为DSS联合LPS诱导炎症模型的造模细胞，通过测定细胞抑制率和细胞上清液TNF‑α，IL‑1β水平确定了葡聚糖硫酸钠和脂多糖溶液的最佳使用浓度和细胞孵育时间，操作容易、成本较低，可帮助初次进行小鼠原代结肠粘膜上皮细胞培养和细胞炎症激模型的研究人员比较顺利的完成小鼠原代结肠粘膜上皮细胞的培养和细胞炎症模型的建立。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 聚糖 硫酸钠 联合 多糖 诱导 小鼠 结肠 粘膜 上皮细胞 炎症 模型 建立 方法 | ||
【主权项】：
1.一种葡聚糖硫酸钠联合脂多糖诱导的小鼠原代结肠粘膜上皮细胞炎症模型的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)用含2％～5％FBS的iCell原代上皮细胞培养液调整小鼠原代结肠粘膜上皮细胞浓度为0.5×105～1×106个/mL，并接种于细胞培养板，培养过夜；然后每孔加入等体积的含有5～15％葡聚糖硫酸钠的不含血清的iCell原代上皮细胞培养液，继续培养1～4h；(2)弃去细胞培养液，PBS浸泡，弃去，每孔再加入等体积的含有1～100μg/mL脂多糖的不含血清的iCell原代上皮细胞培养液，继续培养3～24h，收集细胞，得到葡聚糖硫酸钠联合脂多糖诱导的小鼠原代结肠粘膜上皮细胞炎症模型。
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