[发明专利]一种体外稳定扩增高纯度、高细胞毒活性NK细胞的方法在审
| 申请号： | 201910066688.6 | 申请日： | 2019-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN109810944A | 公开（公告）日： | 2019-05-28 |
| 发明（设计）人： | 赵报;邓蒙蒙;刘丹;吴疆;王保如;程箫 | 申请（专利权）人： | 安徽瑞达健康产业有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 合肥方舟知识产权代理事务所(普通合伙) 34158 | 代理人： | 刘跃 |
| 地址： | 230088 安徽省合肥市高新区*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开一种体外稳定扩增高纯度、高细胞毒活性NK细胞的方法，体外稳定扩增NK细胞方法包括以下步骤：(1)分离单个核细胞；(2)免疫分选去除CD3+T淋巴细胞；(3)加入含NK细胞扩增所需细胞因子(终浓度为10‑500ng/ml IL‑15、10‑500ng/ml IL‑12、10‑500ng/ml IL‑21、10‑500ng/ml IL‑18和500‑2000U/ml IL‑2)的无血清培养基；(4)第2‑5天NK细胞全换液；(5)NK细胞收获。该方法可以稳定获得大量高纯度、高细胞毒活性NK细胞，可用于肿瘤细胞免疫治疗。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞毒活性 扩增 种体 增高 无血清培养基 单个核细胞 免疫分选 免疫治疗 细胞因子 肿瘤细胞 高纯度 换液 可用 去除 体外 收获 | ||
【主权项】：
1.一种体外稳定扩增高纯度、高细胞毒活性NK细胞的方法，包括以下步骤：(1)分离单个核细胞；(2)免疫去除CD3+T淋巴细胞，去除CD3+T淋巴细胞后的单个核细胞的接种浓度为0.1‑2×106cells/ml；(3)加入无血清培养基和扩增因子；(4)培养第2‑5天全换液；(5)NK细胞收获；其特征在于：步骤3中加入的扩增因子为：IL‑15、IL‑12、IL‑21、IL‑18、IL‑2。
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