[发明专利]有机磷降解酶高密度发酵制备方法在审

专利信息
申请号: 201910068545.9 申请日: 2019-01-24
公开(公告)号: CN109593734A 公开(公告)日: 2019-04-09
发明(设计)人: 李立公;管立忠;王璋 申请(专利权)人: 北京森根比亚生物工程技术有限公司
主分类号: C12N9/00 分类号: C12N9/00;C12N15/52;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84
代理公司: 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 代理人: 余光军
地址: 101407 北京市怀*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种有机磷降解酶的高密度发酵制备方法,包括:(1)构建机磷降解酶毕赤酵母酵母表达载体并转入到毕赤酵母得到重组毕赤酵母酵母菌株;(2)将重组毕赤酵母酵母菌株依次在一级种子发酵罐、二级种子发酵罐和三级种子发酵罐中进行扩培得到三级种子;(3)将三级种子接入到发酵罐中的高密度发酵培养基中进行诱导培养;期间,通过补料罐补加发酵培养基。本发明主要通过对酵母细胞在种子罐和发酵罐生长和表达的分析,结合酵母生长和外源蛋白表达所需的营养物质、溶氧浓度、培养温度、发酵液的pH值,补料方式以及诱导过程中甲醇浓度、温度、pH、溶氧、残糖等因素对菌体表达的影响,有效提高了机磷降解酶的产量并降低了生产成本。
搜索关键词: 发酵罐 高密度发酵 三级种子 有机磷降解酶 重组毕赤酵母 毕赤酵母 酵母菌株 降解酶 机磷 溶氧 制备 酵母表达载体 外源蛋白表达 发酵培养基 二级种子 酵母生长 酵母细胞 一级种子 营养物质 诱导培养 培养基 补料罐 发酵液 种子罐 补加 补料 残糖 构建 甲醇 菌体 扩培 生产成本 发酵 诱导 转入 生长 分析
【主权项】:
1.一种有机磷降解酶的高密度发酵制备方法,其特征在于,包括:(1)构建含有机磷降解酶的毕赤酵母酵母表达载体并转入到毕赤酵母得到重组毕赤酵母酵母菌株;(2)将重组毕赤酵母酵母菌株依次在一级种子发酵罐、二级种子发酵罐和三级种子发酵罐中进行扩培得到三级种子液;(3)将三级种子液接入到发酵罐中的高密度发酵培养基中进行发酵并进行诱导培养表达;期间,通过补料罐补加甘油或甲醇。
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