[发明专利]幽门螺杆菌检测体系及检测试剂盒和应用

摘要

本发明属于生物技术领域，涉及一种复合扩增体系及检测试剂盒和应用，更具体的说，它涉及幽门螺杆菌的鉴定、分型及抗生素耐药性检测体系及试剂盒，即幽门螺杆菌检测体系及试剂盒和应用。本发明提供一种幽门螺杆菌检测体系，包括4种分别用于幽门螺杆菌的鉴定、分型及抗生素耐药性的扩增体系的一种或多种的组合，可以无创、快速、便捷、准确、全面的用于幽门螺杆菌鉴定、分型及抗生素耐药性检测体系。

主权项

1.幽门螺杆菌检测体系，包括以下4种扩增体系的一种或多种的组合：1)对菌种鉴定基因16S rRNA和23S rRNA进行检测的引物及探针的幽门螺杆菌鉴定复合扩增体系；其中，引物为：16S rRNA引物：16‑F：GAGAAGCAATACTGCGAAGTGGAG16‑R：GCGATTCCAGCTTCATGCA23S rRNA引物：23‑F：TTCAGTGAAATTGTAGTGGAGGTG23‑R：TCCCATTAGCAGTGCTAAGTTGTA探针为：16S‑P:X‑CTCAGTTCGGATTGTAGGCTGCAAC‑(MGB)23S‑P:X‑CAAGACGGAAAGACC‑(MGB)；2)对菌株分型基因CagA进行检测的引物及探针的幽门螺杆菌分型鉴定扩增体系；其中，引物为：CagA‑F：AGCAGGTAAAGGAGTGGGCGCagA‑R：TTTGCCTCATCAAAATCAATTGTAG探针为：CagA‑P:X‑GCTAGCCCTGAACCCATTTACGCTAC‑(MGB)；3)包括对菌株克拉霉素耐药基因23S rRNA的2个突变位点进行检测的引物及探针的幽门螺杆菌克拉霉素耐药性突变检测复合扩增体系；其中，引物为：23‑F：TTCAGTGAAATTGTAGTGGAGGTG23‑R：TCCCATTAGCAGTGCTAAGTTGTA探针为：23S‑P2142m:X‑CAAGACGGgAAGACC‑(MGB)23S‑P2143m:X‑CAAGACGGAgAGACC‑(MGB)；4)包括对菌株左氧氟沙星耐药基因gyrA的3个突变位点进行检测的引物及探针的幽门螺杆菌左氧氟沙星耐药性突变检测复合扩增体系；其中，引物为：gyrA‑F：ATCGTGGGTGATGTGATTGGTgyrA‑R：CATAGAAAAATCTTGCGCCATTC体系中涉及的探针为：gyrA‑P261m:X‑ATGGCGACACRGCAGT‑(MGB)gyrA‑P271m:X‑CAGTTTATWATGCGTTAGTG‑(MGB)gyrA‑P272m:X‑CAGTTTATGGTGCGTTAGTG‑(MGB)gyrA‑P271+272m:X‑CAGTTTATAGTGCGTTAGTG‑(MGB)X为5’端连接的荧光物质，为FAM、NED、VIC、Cy5、Cy3或ROX。