[发明专利]一种扩增H5N6亚型禽流感病毒全基因组的通用引物组、试剂盒及方法在审
| 申请号： | 201910078143.7 | 申请日： | 2019-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN109593892A | 公开（公告）日： | 2019-04-09 |
| 发明（设计）人： | 仇微红;叶贺佳;梁昭平;盛圆贤;许芬芬;李敏;钟文婷 | 申请（专利权）人： | 广州市华南农大生物药品有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 谭英强;舒胜英 |
| 地址： | 511300 广东省广州市增城*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种扩增H5N6亚型禽流感病毒全基因组的通用引物组、试剂盒及方法，设计的引物组进行一步法RT‑PCR扩增，12对引物所有体系一致、退火温度一致，扩增条件一致，此方法省去了一个引物一个最适退火温度的操作，使操作方法更加简便，省时、省力。同一反应程序可以同时扩增多种基因片段，可快速获得H5N6亚型禽流感病毒的基因组全长序列，扩增H5N6亚型禽流感病毒全基因组时间较短，1.5天可获得全基因组。具有简便，耗时少，节约成本等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 亚型禽流感病毒 全基因组 扩增 退火 通用引物 试剂盒 基因组全长序列 反应程序 基因片段 扩增条件 温度一致 对引物 一步法 引物组 省力 省时 引物 耗时 节约 | ||
【主权项】：
1.一种扩增H5N6亚型禽流感病毒全基因组的通用引物组，其核苷酸序列如下所示：引物对1：HA1‑F：AGCARAAGCAGGG(SEQ ID NO:1)HA1‑R：TCTGCTCAATAGGTGTT(SEQ ID NO:2)引物对2：HA2‑F：CCAAAATRAACGGGCA(SEQ ID NO:3)HA2‑R：AGTAGAAACAAGGGTGR(SEQ ID NO:4)引物对3：NA‑F：AGGGTGAAAATGAAT(SEQ ID NO:5)NA‑R：CTCCTGTTGCTGAAATGCA(SEQ ID NO:6)引物对4：M‑F：TCTTCTAACCGAG(SEQ ID NO:7)M‑R：TTCTATGTTGACAAA(SEQ ID NO:8)引物对5：NS‑F：ACACTGTGTCAAG(SEQ ID NO:9)NS‑R：AAGCTGAAACGAGAAGG(SEQ ID NO:10)引物对6：NP‑F：CGATCTTATGAACAGA(SEQ ID NO:11)NP‑R：CTGCATTGTCTCCGAAG(SEQ ID NO:12)引物对7：PA1‑F：AGCRAAAGCAGGTACTGATY(SEQ ID NO:13)PA1‑R：CATNCCCATCATCAT(SEQ ID NO:14)引物对8：PA2‑F：ACATTTTTCGGCTGGAAA(SEQ ID NO:15)PA2‑R：GAAACAAGGCATTTT(SEQ ID NO:16)引物对9：PB11‑F：GAGACTGGAGCACCYCAACT(SEQ ID NO:17)PB11‑R：AGCRAAAGCAGGCAAACY(SEQ ID NO:18)引物对10：PB12‑F：CRAAAGCAGGTCAAWTATAT(SEQ ID NO:19)PB12‑R：ACAAGGTCGTTTTWAAACW(SEQ ID NO:20)引物对11：PB21‑F：ARTTCACAATGGTTGG(SEQ ID NO:21)PB21‑R：ACAAGGCATTTTTTCA(SEQ ID NO:22)引物对12：PB22‑F：TAATAAAGCTGCTACC(SEQ ID NO:23)PB22‑R：CAGCAGGTYCCTT(SEQ ID NO:24)。
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