[发明专利]新型基因治疗载体pIRES-Rsirt2/4-Tet-nap的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种pIRES‑Rsirt2/4‑Tet‑nap重组质粒，其沿载体转录方向依次连接有R‑Sirt2基因、IRES序列、R‑Sirt4基因、HSV TK polyA序列、tTA序列、TRE序列和nap序列，或者反向连接。其中，R‑Sirt2和R‑Sirt4基因的功能是重构线粒体网络并逆转衰老细胞表型；IRES序列则是连接sirtuin2基因和sirtuin4基因，使两者反向共表达；tTA和TRE是四环素诱导表达元件，调控DNA结合和分子伴侣介导自噬的肽段nap序列表达。本发明所述的自噬重组载体，采用IRES序列连接sirtuin2和sirtuin4基因，能在同一载体中共表达Sirtuin2和Sirtuin4蛋白，表达后由四环素元件调控质粒DNA细胞内自噬。故该重组质粒可用于基因治疗线粒体功能障碍相关疾病的药物中的应用。