[发明专利]一种研磨与混合酶结合的提取脐带间充质干细胞的方法在审
| 申请号： | 201910088003.8 | 申请日： | 2019-01-29 |
| 公开（公告）号： | CN109628394A | 公开（公告）日： | 2019-04-16 |
| 发明（设计）人： | 高戎戎;马林 | 申请（专利权）人： | 劳敏翔 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 上海尚象专利代理有限公司 31335 | 代理人： | 刘云 |
| 地址： | 310000 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种研磨与混合酶结合的提取脐带间充质干细胞的方法，其包含：步骤1、将脐带两端去除，并清洗脐带动静脉中的血渍；步骤2、将脐动脉和脐静脉剔除，将脐带剪成小块，剥离出来胶层，剪成更小的块状；步骤3、将组织块分装入离心管，用组织研磨机将组织研磨成肉糜；步骤4、用胶原蛋白酶和胰蛋白酶与肉糜悬液混合，置于摇床中震荡；步骤5、再用培养基中和后，离心去上清，再与培养液混合，加入细胞培养瓶中；步骤6、静置培养，然后用酶消化，再进行传代培养；步骤7、继续培养一段时间后，P1代再进行传代培养，P2代冻存。本发明基于组织研磨法与消化结合的方法，能够大大提高原代细胞得率，减少细胞损伤。 | ||
| 搜索关键词： | 脐带间充质干细胞 传代培养 组织研磨 研磨 混合酶 脐带 肉糜 胰蛋白酶 培养液 血渍 胶原蛋白酶 细胞培养瓶 组织研磨机 静置培养 细胞损伤 原代细胞 培养基 离心管 酶消化 脐带剪 脐动脉 脐静脉 组织块 得率 冻存 胶层 小块 悬液 摇床 去除 装入 静脉 剔除 清洗 震荡 剥离 中和 消化 | ||
【主权项】：
1.一种研磨与混合酶结合的提取脐带间充质干细胞的方法，其特征在于，所述的方法包含：步骤1、将脐带两端去除，并清洗脐带动静脉中的血渍；步骤2、将脐动脉和脐静脉剔除，将脐带剪成小块，剥离出来胶层，剪成更小的块状；步骤3、将组织块分装入离心管，用组织研磨机将组织研磨成肉糜；步骤4、用胶原蛋白酶和胰蛋白酶与肉糜悬液混合，置于摇床中震荡；步骤5、再用培养基中和后，离心去上清，再与培养液混合，加入细胞培养瓶中；步骤6、静置培养，然后用酶消化，再进行传代培养；步骤7、继续培养一段时间后，P1代再进行传代培养，P2代冻存。
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