[发明专利]小鼠巨噬细胞人补体膜攻击复合物体外模型及构建和应用在审

专利信息
申请号: 201910094534.8 申请日: 2019-01-27
公开(公告)号: CN110241082A 公开(公告)日: 2019-09-17
发明(设计)人: 潘昱辰;王存金 申请(专利权)人: 潘昱辰
主分类号: C12N5/0786 分类号: C12N5/0786;C12Q1/02
代理公司: 太原申立德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14115 代理人: 郭海燕
地址: 225003*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明属于免疫系统技术领域,具体涉及一种小鼠巨噬细胞人补体膜攻击复合物体外模型及构建方法和应用。本发明小鼠巨噬细胞人补体膜攻击复合物体外模型,通过以下步骤构建形成:(1)将1mL灭菌后的质量百分数为3%的硫乙醇酸盐培养基注入小鼠腹腔,两天后抽腹水,离心后去上清及红细胞,加DF12培养液重新制备成细胞悬液,再将细胞悬液滴入孔板或破片上,即为原代巨噬细胞;(2)根据不同的需求向原代巨噬细胞的培养液中添加C5b‑6、C7、C8和C9,孵育后形成小鼠巨噬细胞人补体体外模型,同时根据实验需要添加不同量的人补体成分C5b‑6、C7、C8和C9可以控制形成的MAC的量的多少,达到溶破杀伤细胞或者是调控细胞功能的效果。
搜索关键词: 人补体 小鼠巨噬细胞 复合物体 培养液 巨噬细胞 细胞悬液 构建 攻击 硫乙醇酸盐培养基 红细胞 质量百分数 步骤构建 免疫系统 杀伤细胞 体外模型 细胞功能 小鼠腹腔 灭菌 腹水 滴入 孵育 孔板 破片 制备 应用 调控
【主权项】:
1.一种小鼠巨噬细胞人补体膜攻击复合物体外模型,其特征是通过以下步骤构建形成:(1)将1mL灭菌后的质量百分数为3%的硫乙醇酸盐培养基注入小鼠腹腔,两天后抽腹水,离心后去上清及红细胞,加DF12培养液重新制备成细胞悬液,再将细胞悬液滴入孔板或破片上,即为原代巨噬细胞;(2)根据不同的需求向原代巨噬细胞的培养液中添加C5b‑6、C7、C8和C9,孵育后形成小鼠巨噬细胞人补体体外模型,同时根据实验需要添加不同量的人补体成分C5b‑6、C7、C8和C9可以控制形成的MAC的量的多少,达到溶破杀伤细胞或者是调控细胞功能的效果。
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