[发明专利]一种适用于氨基残留物检测的高灵敏免疫层析方法在审
| 申请号： | 201910097930.6 | 申请日： | 2019-01-31 |
| 公开（公告）号： | CN109884039A | 公开（公告）日： | 2019-06-14 |
| 发明（设计）人： | 张勋 | 申请（专利权）人： | 江苏美正生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/78 | 分类号： | G01N21/78;G01N33/543;G01N33/558;G01N33/577 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 楼高潮 |
| 地址： | 214135 江苏省无锡市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种适用于氨基残留物检测的高灵敏免疫层析方法，检测方法包括以下步骤：（1）乙醛酸上的羧基与生物素进行连接，制得生物素修饰的乙醛酸，作为氨基残留物检测的通用中间体；（2）制备氨基残留物抗体修饰的磁性粒子和质控抗体修饰的磁性粒子；（3）生物素修饰的乙醛酸与氨基残留物反应，并与氨基残留物抗体修饰的磁性粒子孵育后，通过磁分离洗涤制得待检测物；将质控抗体修饰的磁性粒子与上述待检测物进行混合，制得混合检测物；（4）试纸条组装与免疫层析检测。该方法实现了组织样本中氨基残留物的分离，简化了目标物的分离纯化步骤，并且通过信号放大效应，提高了目标物检测的灵敏度。 | ||
| 搜索关键词： | 氨基 磁性粒子 残留物检测 乙醛酸 生物素修饰 待检测物 抗体修饰 免疫层析 质控抗体 修饰 灵敏 免疫层析检测 磁分离洗涤 目标物检测 通用中间体 分离纯化 组织样本 检测物 灵敏度 目标物 生物素 试纸条 孵育 羧基 制备 组装 检测 | ||
【主权项】：
1.一种适用于氨基残留物检测的高灵敏免疫层析方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）乙醛酸上的羧基与生物素进行连接，制得生物素修饰的乙醛酸，作为氨基残留物检测的通用中间体；（2）制备氨基残留物抗体修饰的磁性粒子和质控抗体修饰的磁性粒子；（3）生物素修饰的乙醛酸与氨基残留物反应，并与步骤（2）制得的氨基残留物抗体修饰的磁性粒子在室温下孵育，通过磁分离去除上清并使用磷酸盐缓冲液分离洗涤，最后一次洗涤完成后将磁性粒子再次用磷酸盐缓冲液重悬，再次重悬后的溶液即为待检测物；将质控抗体修饰的磁性粒子再与上述待检测物进行混合，制得混合待检测物；（4）以底板、样品垫、层析膜、吸水垫和外壳构建成免疫层析试纸条，层析膜上设有检测线和质控线，检测线上固定有链霉亲和素，质控线上固定有识别质控抗体的二抗，所述层析膜、底板和外壳均没有荧光特性；（5）将混合待检测物滴加于试纸条的样品垫处，进行免疫层析，当混合检测液流经检测线和质控线后，检测线和质控线的位置将会出现指示信号，根据检测线的信号强度，实现目标物的定量检测。
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