[发明专利]能检测多种禽呼吸道病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒有效
| 申请号： | 201910109233.8 | 申请日： | 2019-02-06 |
| 公开（公告）号： | CN109706269B | 公开（公告）日： | 2022-07-01 |
| 发明（设计）人： | 周莹珊;邵春艳;宋厚辉;王晓杜;陈琳;姜胜;宋泉江;周彬;杨杨;杨永春;孙静;程昌勇 | 申请（专利权）人： | 浙江农林大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/93 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人： | 周世骏 |
| 地址： | 311304 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及检验检疫领域，旨在提供一种能检测多种禽呼吸道病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒。该试剂盒中包括：预扩增引物混合液，含有序列如SEQ ID NO：1～14所示预扩增引物；探针混合液，含有序列如SEQ ID NO：15～28所示的左侧探针和右侧探针；MLPA缓冲液；连接缓冲液A；连接缓冲液B；连接酶Ligase‑65；PCR反应混合液，含有序列SEQ ID NO：29和30所示的通用引物；SALSA聚合酶；阴性对照；阳性对照。本发明所述试剂盒具有高通量特点，能同时检测7种病原，利用全自动核酸分析仪，每次可同时检测96个样品，为病原体的鉴别诊断和应急诊断提供高通量检测技术。另外，还具备特异性好和灵敏度高的优点，通过增加RT‑PCR步骤对目标基因进行富集，最低可检出1拷贝的目标基因。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 多种 呼吸道 病原 多重 连接 探针 扩增 鉴别 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.能检测多种禽呼吸道病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒，其特征在于，该试剂盒中包括：(1)预扩增引物混合液；该混合液中包括预扩增引物，其序列如SEQ ID NO：1～14所示；(2)探针混合液；该混合液中包括左侧探针和右侧探针，其序列如SEQ ID NO：15～28所示；(3)MLPA缓冲液；(4)连接缓冲液A；(5)连接缓冲液B；(6)连接酶Ligase‑65；(7)PCR反应混合液，其包括如序列SEQ ID NO：29和30所示的通用引物；(8)SALSA聚合酶；(9)阴性对照；(10)阳性对照。
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