[发明专利]一种重离子辐射拟南芥菜基因组靶点的高效标记方法在审
| 申请号： | 201910123642.3 | 申请日： | 2019-02-19 |
| 公开（公告）号： | CN109777882A | 公开（公告）日： | 2019-05-21 |
| 发明（设计）人： | 卞坡;王婷;吴京京 | 申请（专利权）人： | 中国科学院合肥物质科学研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 合肥市浩智运专利代理事务所(普通合伙) 34124 | 代理人： | 王亚洲 |
| 地址： | 230031 安徽*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开一种重离子辐射拟南芥菜基因组靶点的高效标记方法，涉及重离子植物辐射诱变育种机理研究领域，基于现有的报告基因在标记重离子辐射植物基因组靶点方面的不足的问题提出的，本发明采用拟南芥菜同源重组报告系作为实验材料，以该报告基因受到DNA双链断裂损伤发生同源重组修复后恢复报告基因活性的方式来高效标记重离子辐射植物基因组的靶点，通过PCR高保真扩增该重组片段及其侧翼基因组序列，克隆测序检测扩增序列碱基突变情况，从而标记重离子辐射植物基因组靶点。本发明的有益效果在于：该方法实验操作简单，标记效率高，且受DNA双链断裂特异诱导。 | ||
| 搜索关键词： | 重离子辐射 靶点 植物基因组 报告基因 拟南芥菜 同源重组 基因组 侧翼基因组序列 辐射诱变育种 标记效率 机理研究 碱基突变 克隆测序 扩增序列 实验材料 实验操作 高保真 重离子 扩增 损伤 诱导 修复 检测 恢复 | ||
【主权项】：
1.一种重离子辐射拟南芥菜基因组靶点的高效标记方法，其特征在于：包括以下步骤：以模式植物拟南芥菜GUS同源重组报告系R3L66为材料，对拟南芥菜进行重离子辐照，待拟南芥菜萌发后提取DNA，对同源重组后序列进行特异性扩增和测序，以报告基因GUS发生同源重组作为高效标记重离子在拟南芥基因组上的作用靶点。
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