[发明专利]黄颡鱼杆菌样病毒全基因组克隆方法在审
| 申请号： | 201910128137.8 | 申请日： | 2019-02-21 |
| 公开（公告）号： | CN109735534A | 公开（公告）日： | 2019-05-10 |
| 发明（设计）人： | 魏永伟;章晓栋;刘晓瑜;徐昊;沈丹娜;孟程唯 | 申请（专利权）人： | 绍兴文理学院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806;C12R1/93 |
| 代理公司： | 绍兴市越兴专利事务所(普通合伙) 33220 | 代理人： | 蒋卫东 |
| 地址： | 312000 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物技术领域，本发明公开了一种黄颡鱼杆菌样病毒全基因组克隆方法。方法的步骤为：设计14条特异性引物用于反转录和14对特异性引物用于PCR，引物序列如SEQ ID No.1～SEQ ID No.14；提取黄颡鱼杆菌样病毒RNA；以提取的病毒RNA为模板，用上述引物分别添加到反转录和PCR反应体系，反应条件分段克隆克隆黄颡鱼杆菌样病毒全基因组，扩增的产物其中13个片段大小为2000bp，一个片段大小为1000bp，共计14个片段含盖黄颡鱼杆菌样病毒基因组全部序列。本发明提供了黄颡鱼杆菌样病毒全基因组的克隆方法，该方法不仅可以用于黄颡鱼杆菌样病毒全基因组的快速克隆，也可以用于研究黄颡鱼杆菌样病毒的分子生物学致病机制和分子流行病学调查，使用方便，具有良好的效果。 | ||
| 搜索关键词： | 黄颡鱼 杆菌 病毒全基因组 克隆 特异性引物 病毒RNA 反转录 分子流行病学 生物技术领域 病毒基因组 分子生物学 反应条件 引物序列 致病机制 扩增 引物 分段 病毒 调查 研究 | ||
【主权项】：
1.一种黄颡鱼杆菌样病毒全基因组克隆的方法，其特征在于，方法的步骤为：（1）黄颡鱼杆菌样病毒全基因组克隆引物的设计；（2）黄颡鱼杆菌样病毒RNA的抽提；（3）黄颡鱼杆菌样病毒全基因组cDNA反转录体系和反应条件；（4）黄颡鱼杆菌样病毒全基因组PCR体系和反应条件；（5）黄颡鱼杆菌样病毒全基因组测序。
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