[发明专利]一种从水稻种子中筛选降镉菌的筛选方法在审
| 申请号： | 201910139339.2 | 申请日： | 2019-02-25 |
| 公开（公告）号： | CN109943500A | 公开（公告）日： | 2019-06-28 |
| 发明（设计）人： | 黎娟;郑重谊;黎鹏;刘智炫;周清明 | 申请（专利权）人： | 湖南农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20 |
| 代理公司： | 长沙和雅知识产权代理事务所(普通合伙) 43238 | 代理人： | 林传贵 |
| 地址： | 410128 *** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本申请公开了一种从水稻种子中筛选降镉菌的筛选方法。包括以下步骤：表面消毒：筛选颗粒饱满的水稻种子，先用有效氯含量为1％的NaCLO漂洗，漂洗后收集种子，再用无菌水清洗；分离纯化：在培养基中培养内生细菌，采用30℃恒温培养箱培养，不定期观察出菌情况；挑选不同外观形态的单菌落，进行保存；鉴定：对所有分离出来的种子内生菌进行生物学特性分析：产铁载体功能定性检测、分泌IAA功能检测、溶磷功能检测、固氮功能和耐Cd性检测；同时对其进行分子生物学鉴定；筛选：通过对所有菌株的生物学特性检测的结果，选择其中综合生理功能优势的菌株作为优势菌进行保存。本方法能够从水稻种子中全面地筛选出降镉菌。 | ||
| 搜索关键词： | 筛选 水稻种子 功能检测 漂洗 菌株 分子生物学鉴定 生物学特性分析 恒温培养箱 生物学特性 无菌水清洗 有效氯含量 表面消毒 定性检测 分离纯化 固氮功能 生理功能 外观形态 培养基 保存 单菌落 内生菌 铁载体 优势菌 检测 溶磷 分泌 细菌 观察 申请 | ||
【主权项】：
1.一种从水稻种子中筛选降镉菌的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：表面消毒：筛选颗粒饱满的水稻种子，先用有效氯含量为1％的NaCLO漂洗10分钟，漂洗后收集种子，再用无菌水清洗5次，每次1分钟；种子研磨：根据研磨罐的容量，加入适量的水稻种子，研磨1‑2分钟，得到种子研磨液；分离纯化：将所述种子研磨液涂布在培养基中，在所述培养基中培养水稻种子的内生细菌，采用30℃恒温培养箱培养，不定期观察出菌情况；挑选不同外观形态的单菌落，进行保存；鉴定：对所有分离出来的种子内生菌进行生物学特性分析：产铁载体功能定性检测、分泌IAA功能检测、溶磷功能检测、固氮功能检测、耐Cd性检测和降镉功能检测；同时对其进行分子生物学鉴定；筛选：通过对所有菌株的生物学特性检测的结果，选择其中综合生理功能合格的具有降镉功能的菌株作为优势菌进行保存。
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