[发明专利]一种去甲金霉素菌株培育及筛选方法

摘要

本发明公开了一种去甲金霉素菌株培育及筛选方法，包括配置培养母液，菌种接种，菌种培育，荧光标记，筛选及浓缩提纯。本发明一方面操作简单，培育及筛选效率高，且成本低廉，对环境污染小，另一方面可有效的提高去甲金霉素菌株产品质量的稳定性和产量，从而极大的提高去甲金霉素菌生产效率和质量的同时，另取得良好的经济效益和社会效益。

主权项

1.一种去甲金霉素菌株培育及筛选方法，其特征在于，所述的去甲金霉素菌株培育及筛选方法包括如下步骤：第一步，配置培养母液，首先根据使用需要，在培养釜中配置去甲金霉素菌株培养母液，然后在10—30分钟内，将去甲金霉素菌株培养母液匀速升温至25℃—35℃并保温，然后对去甲金霉素菌株培养母液进行30—80分钟超声波乳化作业，并在完成超声波乳化作业后对去甲金霉素菌株培养母液保温静置10—30分钟；第二步，菌种接种，首先在无菌环境避光条件下，对培养皿和过承载架进行辐照灭活处理，然后通过菌种接种装置将去甲金霉素菌种均与涂布在若干培养皿上表面，让后将各培养皿通过承载架沿竖直方向进行交错固定，且各培养皿上表面均与水平面平行分布，即可完成菌种接种；第三步，菌种培育，然后在无菌环境避光条件下，将第一步配置的培养母液以3—5次/10小时的频率均匀喷淋至培养皿上端面的将去甲金霉素菌种上，并在25℃—35℃恒温环境下培育2—5天，即可得到将去甲金霉素菌株；且培育过程中，培养皿上端面的培养母液液面高出培养皿上端面的将去甲金霉素菌种上端面1—10毫米，并在每次完成培养母液喷淋后，对各培养皿进行100—160r/min振荡条件下持续匀速振荡10—20分钟，且振荡时培养面上端面与水平面间夹角不大于30°；第四步，荧光标记，完成第三步作业后，在保持第三步操作条件不变的前提下，继续持续培育1—3天，在进行该步骤培育时，选择各培养皿中的其中一个为标的培养皿，然后向喷淋到标的培养皿的培养母液中混合入生物标记物，并使生物标记物于培养母液一同喷淋到标的培养皿物中；第五步，筛选，将经过培育后第四步中标的培养皿中的去甲金霉素菌株进行生物标记物浓度检测，并根据生物标记物浓度分布区域对标的培养皿中去甲金霉素菌株进行划分，然后根据标的培养皿中去甲金霉素菌株进行划分分布结构，依次对剩余各培养皿中菌株进行相同分布结构的划分，从而即可完成不同菌株质量划分筛选作业；第六步，浓缩提纯，根据第五步划分筛选的结果，对除标的培养皿外的其他培养皿中的同区域内的去甲金霉素菌株进行分类收集汇合，然后将不符合标准的区域内的去甲金霉素菌株进行去除并无害化处理，对各区域内的去甲金霉素菌株的浓度机发育状态分别进行浓缩提纯，并使浓缩提纯后各区域内的去甲金霉素菌株的浓度机发育状态保持一致后进行二次汇合即可得到成品。