[发明专利]一种胚胎的玻璃化冷冻和解冻方法

摘要

本发明公开了一种胚胎的玻璃化冷冻和解冻方法，属胚胎生物技术领域。技术方案包括：将冷冻液和解冻液分段装入细管，每段液体用空气隔开，其中一段冷冻液中置入了胚胎，后封口细管、投入液氮，特征是，装入细管内的冷冻液和解冻液各有两段，冷冻液与解冻液的体积比小于或等于1∶5，或混合后混合液中抗冻保护剂的浓度在2.0Mol/L以内。本发明的简易解冻和移植法为，在室温下，将冷冻保存胚胎的细管由液氮中取出，空气浴4~6s，20~25℃水浴，取出细管，来回颠倒甩动细管，使冷冻液混合均匀，即移植胚胎。本发明极大地简化了胚胎玻璃化冷冻后的解冻程序，实现了胚胎在管内脱毒、直接移植，简易方便，可操作性强，利于推广应用。

主权项

1.一种胚胎的玻璃化冷冻法，是将冷冻液和解冻液分段装入细管 内，每段液体之间都用一段空气隔开，其中在一段冷冻液中置 入了经过预处理液处理过的胚胎，然后将细管封口、投入液氮， 其特征在于，装入细管内的冷冻液和解冻液各有两段，其装管 顺序为：首先装入一段解冻液(6)，然后装入一段空气(3)， 接着装入一段冷冻液(5)，再装入一段空气(3)，然后再装入 一段冷冻液(4)，并在该段冷冻液中置入胚胎，接着再装入一 段空气(3)，最后在管端装入一段解冻液(2)并封闭管口；装 入细管内的冷冻液与解冻液的体积比值小于或等于1∶5，或混 合后混合液中抗冻保护剂的浓度在2.0Mol/L以内。