[发明专利]复合菌种固态发酵亚麻饼脱毒方法

摘要

本发明公开了一种复合菌种固态发酵亚麻饼脱毒方法，包括菌种活化、制备液体菌种、制备生产发酵剂培养基、制备生产发酵剂、制备复合菌种生产发酵剂、制备固体发酵原料、固体发酵的高压处理。本发明从益生菌中筛选出对亚麻饼脱毒较好的菌株，再行组合筛选出互作效果好的复合菌种，先经固态发酵脱除大多数的生氰糖苷，最后经高压处理彻底脱除。该方法脱除生氰糖苷效率高，设备投资少，生产成本低，出品率高，经济效益好。

主权项

1.一种复合菌种固态发酵亚麻饼脱毒方法，包括如下步骤：（1）菌种活化A AS2.112酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）活化 将AS2.112酿酒酵母接到斜面YPD培养基中，在25‑30℃培养2‑4d，备用；B CGMCC NO.10921植物乳杆菌Grx16( Lactobacillus plantarum Grx16) 活化，将CGMCC NO.10921植物乳杆菌Grx16接到斜面MRS培养基中，36‑38℃、厌氧培养2‑3d，备用；（2）制备液体菌种A AS2.112酿酒酵母 洁净容器中装入不加琼脂的酵母蛋白胨葡萄糖YPD培养基，0.10MPa灭菌15‑25min，冷却后接入（1）活化的AS2.112酿酒酵母斜面菌种，24‑30℃、100‑160r／min振荡培养2‑3d；B CGMCC NO.10921植物乳杆菌Grx16 洁净容器中装入不加琼脂的MRS培养基，0.10MPa灭菌15‑25min，冷却后接入（1）活化的CGMCC NO.10921植物乳杆菌Grx16斜面菌种，36‑38℃、厌氧、100‑160r／min振荡培养2‑3d，备用；（3）制备生产发酵剂培养基称取玉米粉1份倒入不锈钢容器中，加玉米粉重量4‑5倍的水，加热到85‑95℃糊化10‑15min，降温至70‑82℃时，用6%‑7%的盐酸调节pH至6.2，加入玉米粉重量1%的中高温淀粉酶液化2h，再降温至60‑65℃时用6%‑7%的盐酸调节pH至4.3，再加入玉米粉重量0.1%的糖化酶糖化4h，然后在100℃下灭酶10‑15min，冷却制得玉米粉糖化液，接种前，用凉开水将糖化液再稀释一倍，得发酵剂培养基；（4）制备生产发酵剂A AS2.112酿酒酵母 在（3）制备的生产发酵剂培养基中接入重量比为5%‑6%的（2）制备的酿酒酵母液体菌种，25‑30℃、100‑160r／min振荡培养24‑48h，使酿酒酵母细胞数量达到1.2‑1.6×10⁸个/mL；B CGMCC NO.10921植物乳杆菌Grx16 在（3）制备的生产发酵剂培养基中接入重量比为5%‑6%的（2）制备的植物乳杆菌Grx16液体菌种，36‑38℃、厌氧、100‑160r／min振荡培养36‑48h，使植物乳杆菌Grx16细胞数量达到1.5‑1.8×10⁸个/mL；（5）制备复合菌种生产发酵剂复合菌种生产发酵剂由（4）制备的下列重量份生产发酵剂组成， 1份AS2.112酿酒酵母和1.5份CGMCC NO.10921植物乳杆菌Grx16；（6）制备固体发酵原料固体发酵原料由以下重量份原料组成，100份亚麻饼，40‑45份净水，0.1份硫酸铵，0.4份磷酸二氢钾，0.15份氯化钠，0.2份硫酸镁，15份（5）制备的复合菌种生产发酵剂；（7）固体发酵将步骤（6）的原料混合均匀，升温到28‑30℃发酵24‑36h后，继续升温到36‑38℃、厌氧培养24‑36h；（8）高压处理将步骤（7）生产的固体发酵产物放入高压灭菌容器中， 0.1‑0.15MPa处理10min，脱除残留生氰糖苷，然后烘干，得成品。