[发明专利]一种提高赖氨酸脱羧酶活性和稳定性的分子改造方法在审
申请号: | 201910158461.4 | 申请日: | 2019-03-04 |
公开(公告)号: | CN110004131A | 公开(公告)日: | 2019-07-12 |
发明(设计)人: | 张雷;齐海山;杜岩 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N9/96;C07K19/00;C12N15/70;C12N15/62 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 李素兰 |
地址: | 300350 天津市津南区海*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种提高赖氨酸脱羧酶活性和稳定性的分子改造方法;是在赖氨酸脱羧酶分子LDC的一端连接一段多肽片段EK。包括(1)获得赖氨酸脱羧酶分子的基因片段;(2)将编码EK多肽的基因片段连接到赖氨酸脱羧酶基因的一端;(3)将连接有EK多肽基因的赖氨酸脱羧酶基因连接到表达载体上,转入到宿主中,表达改造后的赖氨酸脱羧酶LDC‑EK。本发明通过对酶分子进行理性的改造,避免了随机突变的不确定性和繁琐的筛选过程;改造后的赖氨酸脱羧酶具有良好的稳定性和催化活性。LDC‑EK催化活性提高2倍,能够在较宽的温度范围内保持较高的活性,并且能够耐多种有机溶剂。方法更易操作,改造后蛋白更易制备。 | ||
搜索关键词: | 赖氨酸脱羧酶 催化活性 分子改造 基因片段 改造 宿主 表达载体 不确定性 多肽基因 多肽片段 基因连接 随机突变 一端连接 有机溶剂 酶分子 多肽 制备 蛋白 筛选 转入 基因 | ||
【主权项】:
1.一种提高赖氨酸脱羧酶活性和稳定性的分子改造方法;其特征是在赖氨酸脱羧酶分子LDC的一端连接一段多肽片段EK。
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