[发明专利]一种利用TEF1启动子调控黏玉米谷氨酰胺转氨酶表达的重组毕赤酵母菌株及构建方法在审
申请号: | 201910162451.8 | 申请日: | 2019-03-05 |
公开(公告)号: | CN109749948A | 公开(公告)日: | 2019-05-14 |
发明(设计)人: | 李洪波;张天琪;毕日秀;吴泽慧 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/81;C12N9/10;C12R1/84 |
代理公司: | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人: | 韩晓梅 |
地址: | 300457 天津市滨*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种利用TEF1启动子调控黏玉米谷氨酰胺转氨酶表达的重组毕赤酵母菌株,所述重组毕赤酵母菌株为将来源于黏玉米(Zea mays)的谷氨酰胺转氨酶(Transglutaminase)基因转入巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中得到的基因工程菌株,该重组毕赤酵母菌株是通过将pPIC9K质粒中的醇氧化酶启动子PAOX1替换成翻译延伸因子1‑α启动子PTEF1,并与谷氨酰胺转氨酶基因连接成环,构成重组表达载体的方式得到的。本重组菌株易于培养、分泌能力强,利于谷氨酰胺转氨酶的大量表达,酶活可达479mU/mL,具有安全可靠的特点,且具有重要的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 重组毕赤酵母菌株 谷氨酰胺转氨酶 黏玉米 谷氨酰胺转氨酶基因 巴斯德毕赤酵母 醇氧化酶启动子 翻译延伸因子 基因工程菌株 重组表达载体 重组菌株 能力强 启动子 调控 成环 分泌 构建 酶活 替换 转入 基因 应用 | ||
【主权项】:
1.一种利用TEF1启动子调控黏玉米谷氨酰胺转氨酶表达的重组毕赤酵母菌株,其特征在于:所述重组毕赤酵母菌株为将来源于黏玉米(Zea mays)的谷氨酰胺转氨酶(Transglutaminase)基因转入巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中得到的基因工程菌株,该重组毕赤酵母菌株是通过将pPIC9K质粒中的醇氧化酶启动子PAOX1替换成翻译延伸因子1‑α启动子PTEF1,并与谷氨酰胺转氨酶基因连接成环,构成重组表达载体的方式得到的。
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