[发明专利]一种组织完整、利于显微观察的植物组织切片的制备方法

摘要

一种鸭茅根部组织石蜡切片的制备方法，包括对新鲜鸭茅根部组织块的杀死与固定、采用的固定液为FAA混合固定液、即为福尔马林：冰醋酸：体积浓度70%乙醇=1:1:18、以体积比计，冲洗，脱水与透明，浸蜡与包埋，修块与切片，展片与烤片，脱蜡、复水与番红染色，固绿染色、脱水与透明，以及封片步骤；在冲洗步骤后、脱水与透明步骤前，还进行琼脂糖预包埋，所述琼脂糖预包埋是将冲洗后的鸭茅根部组织块包埋在经熬化后的5%琼脂糖凝胶中。本发明方法制得的鸭茅根部组织石蜡切片，其组织完整、细胞界限清晰、色彩鲜艳、颜色对比鲜明、切片干净。

主权项

1.一种鸭茅根部组织石蜡切片的制备方法，包括对新鲜鸭茅根部组织块的杀死与固定，冲洗，脱水与透明，浸蜡与包埋，修块与切片，展片与烤片，脱蜡、复水与番红染色，固绿染色、脱水与透明，以及封片步骤；其特征在于：在冲洗步骤后、脱水与透明步骤前，还进行琼脂糖预包埋，所述琼脂糖预包埋是将冲洗后的鸭茅根部组织块包埋在经熬化后的5%琼脂糖凝胶中、以质量百分含量计；所述杀死与固定步骤中，采用的固定液为FAA混合固定液，即为福尔马林：冰醋酸：体积浓度70 %乙醇=1:1:18、以体积比计；所述在杀死与固定后、冲洗前，还进行酸化，具体是将固定好的鸭茅根部组织块置于0.5 mol/L三氯乙酸溶液中，酸化6‑7 d，在酸化过程中，3‑4 d时，更换一次0.5 mol/L三氯乙酸溶液；所述脱水与透明步骤是将经所述琼脂糖预包埋后的鸭茅根部组织块依次置于体积比为1:5:4的正丁醇、体积浓度为95%乙醇、蒸馏水混合液中2 h，置于体积比为2:5:3的正丁醇、体积浓度为95%乙醇、蒸馏水混合液中2 h，置于体积比为3:5:2的正丁醇、体积浓度为95%乙醇、蒸馏水混合液中2 h，置于体积比为5:4:1的正丁醇、体积浓度为100%乙醇、蒸馏水混合液中2 h，置于体积比15:4:1的正丁醇、体积浓度为100%乙醇、蒸馏水混合液中2 h，置于分析纯正丁醇中2 h，再置于分析纯正丁醇中2 h。