[发明专利]一种菠萝蜜过氧化酶的提取、纯化方法及其固定化方法有效
| 申请号： | 201910179207.2 | 申请日： | 2019-03-11 |
| 公开（公告）号： | CN109868264B | 公开（公告）日： | 2020-12-08 |
| 发明（设计）人： | 陶毅明;李铂;李思婧;韦丹;龙祖吉 | 申请（专利权）人： | 桂林医学院 |
| 主分类号： | C12N9/08 | 分类号： | C12N9/08;C12N11/04 |
| 代理公司： | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人： | 黄小榆 |
| 地址： | 541004 广西壮*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种菠萝蜜过氧化酶的提取、纯化方法及其固定化方法，属于固定化酶技术领域。所述菠萝蜜过氧化酶的提取、纯化方法，包括如下步骤：提取：取清洗干净的新鲜菠萝蜜果壳，置于醋酸‑醋酸钠缓冲液中研磨，匀浆，浸提，得到提取液；纯化：将提取液进行低温离心，取上清液，过丙烯酰胺葡聚糖凝胶柱，用醋酸‑醋酸钠缓冲液洗脱，收集洗脱液，测定并收集有酶活性的洗脱液，即得到所述菠萝蜜过氧化酶。本发明还公开了上述菠萝蜜过氧化酶的固定化方法。本发明从新鲜菠萝蜜果壳中提取过氧化酶并进行纯化，开拓了过氧化酶的新来源，且菠萝蜜果壳属于农业废弃物，来源广泛，成本低廉。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 菠萝蜜 氧化酶 提取 纯化 方法 及其 固定 | ||
【主权项】：
1.一种菠萝蜜过氧化酶的提取、纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：提取：取清洗干净的新鲜菠萝蜜果壳，按重量体积比为100g：(200ml‑500ml)，溶于4℃‑8℃预冷的pH值为5‑6.5、浓度为0.1mol/L‑0.2mol/L的醋酸‑醋酸钠缓冲液中研磨，匀浆，于4℃‑8℃浸提24h，得到提取液；纯化：将步骤1得到的提取液进行低温离心，取上清液，过丙烯酰胺葡聚糖凝胶柱，用pH值为5‑6.5、浓度为0.1mol/L‑0.2mol/L的醋酸‑醋酸钠缓冲液洗脱，收集洗脱液，测定并收集有酶活性的洗脱液，即得到所述菠萝蜜过氧化酶。
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