[发明专利]基于靶标激发金纳米粒子表面DNA循环的蛋白质荧光分析方法有效
| 申请号： | 201910191414.X | 申请日： | 2019-03-12 |
| 公开（公告）号： | CN109828120B | 公开（公告）日： | 2021-07-30 |
| 发明（设计）人： | 吴洁;鞠熀先;甘海莹 | 申请（专利权）人： | 南京大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/543;G01N33/58;G01N21/64 |
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| 地址： | 210023 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于靶标激发金纳米粒子表面DNA循环的蛋白质荧光分析方法。该分析方法的检测溶液包括修饰发卡DNA1的金纳米粒子Au‑DNA1、双链DNA识别探针DNA2/DNA3、单链DNA识别探针DNA4和核酸内切酶Nt.BbvCI。DNA1上标记有荧光染料，此荧光染料的荧光被金纳米粒子猝灭。当靶标蛋白存在时，可被识别探针夹心识别，基于邻位效应，DNA4取代DNA2与DNA3杂交，释放的DNA2与Au‑DNA1杂交，激活酶切位点，引发Nt.BbvCI对DNA1的酶切，使得荧光染料远离金纳米粒子表面恢复荧光，此酶切反应可在金纳米粒子表面循环进行，从而放大荧光信号，实现对靶标蛋白的灵敏定量分析。该分析方法操作简单、灵敏、普适性高，具有一定的临床应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 靶标 激发 纳米 粒子 表面 dna 循环 蛋白质 荧光 分析 方法 | ||
【主权项】：
1.本发明涉及一种基于靶标激发金纳米粒子表面DNA循环的蛋白质荧光分析方法，其特征在于该分析方法以含有修饰发卡DNA1的金纳米粒子Au‑DNA1、双链DNA识别探针DNA2/DNA3、单链DNA识别探针DNA4和核酸外切酶Nt.BbvCI的溶液为检测溶液，当靶标蛋白存在时，通过蛋白‑适配体识别方式，被DNA2/DNA3和DNA4夹心识别，基于邻位效应，DNA4取代DNA2与DNA3杂交，释放的DNA2与Au‑DNA1杂交，激活酶切位点，引发Nt.BbvCI对DNA1的酶切，使得标记在DNA1上的荧光染料远离金纳米粒子表面恢复荧光，同时，DNA2被再次释放并引发第二轮酶切，如此循环，放大荧光信号，实现对靶标蛋白的灵敏定量分析。
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