[发明专利]一种光致电化学传感器检测瘦肉精雷托帕明的方法

摘要

本发明属于分析化学与光致电化学传感器领域，具体涉及一种光致电化学传感器检测瘦肉精雷托帕明的方法。用g‑C3N4/CuPPcs修饰金电极，孵育上分子探针，构建光致电化学传感器，在经过雷托帕明与适体DNA作用，以及与捕获复合物CP反应后，以光致电化学信号变化为分析信号，以实现对雷托帕明的测定。

主权项

1.一种光致电化学传感器，包括如下步骤：(1)g‑C₃N₄/CuPPcs的合成A、称取12g尿素于坩埚中，以5℃/min的升温速率，在550℃下煅烧4h；加热结束后，将坩埚自然冷却至室温，并将所得的产物g‑C₃N₄收集，捻碎成粉末，供进一步使用；B、在反应釜中加入0.24g的CuCl₂·2H₂O、1.00g的1,2,4,5‑苯四甲腈、0.076g的(NH₄)₂Mo₂O₇和3.50g的尿素，在200℃下加热5h；加热完毕后自然冷却至室温，将反应物分别用超纯水、丙酮、甲醇清洗数次；真空干燥后，再分别用丙酮、甲醇和三氯甲烷回流12h；然后将得到的固体吸滤后得到聚合钛菁铜CuPPcs；将g‑C₃N₄粉末和CuPPcs组成的一定量混合物分散在水中，在超声波下混合2h，得到g‑C₃N₄/CuPPcs；(2)3D DNA的合成将四条DNA单链P1、P2、P3、P4一起溶解在10mM的Tris‑盐酸含50mM的MgCl₂ pH8.0缓冲液中，得终浓度分别为50μM的DNA混合溶液；随后，将得到的混合物在95℃下加热2min，然后立即冷却至4℃，得到3D DNA结构；(3)捕获复合物CP的制备将OB、SB、LB各5ng放置于200μL的3D DNA结构溶液中，37℃下反应30min，得捕获复合物CP，4℃保存备用；(4)探针probe的制备用柠檬酸钠法制备粒径为20nm的胶体金溶液；将100nM的pDNA和AuNPs溶液混合，形成体积为200μL混合溶液，在37℃下在摇床中孵育24h；然后在15000rpm的转速下离心30min，将沉淀重新分散在200μL的超纯水中；将制备出的pDNA/AuNPs复合物标记为探针probe；(5)g‑C₃N₄/CuPPcs/GE电极的制备在每步修饰电极之前，裸金电极进行预处理：分别用1.0、0.3和0.05μm的氧化铝进行抛光，然后分别在无水乙醇和超纯水中超声5min，备用；将上述制备的20μL浓度为1mg/mL的g‑C₃N₄/CuPPcs溶液均匀滴涂在处理好的GE的表面，在自然环境下干燥；将干燥后的修饰电极记为g‑C₃N₄/CuPPcs/GE；(6)probe/g‑C₃N₄/CuPPcs/GE的制备将制备的40μL的探针滴涂在准备好的g‑C₃N₄/CuPPcs/GE表面，记为probe/g‑C₃N₄/CuPPcs/GE，得光致电化学传感器；所述的DNA部分序列为：以上序列从左到右为5’到3’方向。