[发明专利]量化靶基因的突变型等位基因负担的方法有效
申请号: | 201910219083.6 | 申请日: | 2019-03-21 |
公开(公告)号: | CN110295218B | 公开(公告)日: | 2023-09-01 |
发明(设计)人: | 陈志丞;许家祯 | 申请(专利权)人: | 长庚医疗财团法人嘉义长庚纪念医院 |
主分类号: | C12Q1/6827 | 分类号: | C12Q1/6827 |
代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 | 代理人: | 刘新宇;李茂家 |
地址: | 中国台湾嘉*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明涉及量化在体内的靶基因的突变型等位基因负担的方法及试剂盒。本发明也揭示核酸试剂供应用于制备用来量化在体内的靶基因的突变型等位基因负担的试剂盒的用途,该核酸试剂包括:第一质粒、第二质粒以及反应混合物,其中,使用该试剂盒来量化该靶基因的突变型等位基因负担的步骤包括:提供包括突变型等位基因序列以及内部对照序列的第一质粒,以及包括野生型等位基因序列以及该内部对照序列的第二质粒,以及使该个体的DNA进行定量聚合酶链式反应来测量该靶基因的突变型等位基因表达水平,依据通过该第一与第二质粒的连续稀释所建立的该靶基因的突变型等位基因负担的标准曲线来推定在该个体内的靶基因的突变型等位基因负担。 | ||
搜索关键词: | 量化 基因 突变型 等位基因 负担 方法 | ||
【主权项】:
1.一种量化在体内的靶基因的突变型等位基因负担的试剂盒,其特征在于:该试剂盒包含有下列核酸试剂:反应混合物,其含有(i)用于检测位于该靶基因的第一区域的突变型等位基因序列的突变型等位基因‑特异性引物对与第一可检测的探针,以及(ii)用于检测位于该靶基因的第二区域的内部对照序列的内部对照序列‑特异性引物对与第二可检测的探针,该第二区域不同于该第一区域,该反应混合物用来对得自于该个体的基因组DNA进行第一定量聚合酶链式反应,以测量该靶基因的突变型等位基因表达水平,以及多个标准稀释液,其通过对第一质粒进行使用第二质粒的连续稀释所形成,所述标准稀释液用来进行使用该反应混合物的第二定量聚合酶链式反应,以建立该靶基因的突变型等位基因负担的标准曲线,该标准曲线用来与所测得的靶基因的突变型等位基因表达水平进行比对,以推定在该个体内的靶基因的突变型等位基因负担,其中,该第一质粒包括该位于第一区域的突变型等位基因序列以及该位于第二区域的内部对照序列,该第二质粒包括位于该第一区域的野生型等位基因序列以及该位于第二区域的内部对照序列。
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