[发明专利]一种提高不结球白菜小孢子胚胎诱导率的方法在审
申请号: | 201910220015.1 | 申请日: | 2019-03-22 |
公开(公告)号: | CN109937876A | 公开(公告)日: | 2019-06-28 |
发明(设计)人: | 李英;张西林;侯喜林;王建军;刘同坤;肖栋 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;徐冬涛 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种提高不结球白菜小孢子胚胎诱导率的方法。一种提高不结球白菜小孢子胚胎诱导率的方法,包括:(1)采集花蕾;(2)培育小孢子胚胎:将步骤(1)采集的花蕾消毒清洗、润洗;将润洗后的花蕾研磨,过滤,离心,黄绿色沉淀用添加1号培养基稀释,进行热激处理,24‑26℃暗培养14‑16天,形成胚状体;1号培养基为添加0.04~0.08mg/L6‑BA、10~20mg/L抗坏血酸和1mg/mL活性炭的NLN‑13培养基;(3)成熟胚萌发成植株。本发明所述方法在能够保证出胚率的情况下,简化操作步骤,大大减少了操作时间,提高了植株生产效率。 | ||
搜索关键词: | 小孢子 不结球白菜 胚胎诱导 培养基 花蕾 植株 润洗 采集 简化操作步骤 黄绿色沉淀 活性炭 抗坏血酸 热激处理 生产效率 研磨 暗培养 成熟胚 胚状体 稀释 胚率 过滤 胚胎 清洗 消毒 培育 保证 | ||
【主权项】:
1.一种提高不结球白菜小孢子胚胎诱导率的方法,其特征在于具体包括如下步骤(1)花蕾的选取:选取花瓣与花药长度比为1:1的花蕾;(2)培育小孢子胚胎:将步骤(1)采集的花蕾消毒清洗后用1/2NLN‑13培养基润洗;将润洗后的花蕾充分研磨,过滤,离心,黄绿色沉淀用添加1号培养基稀释,分装到培养皿中热激处理,24‑26℃暗培养14‑16天,形成胚状体;所述的1号培养基为添加0.04~0.08mg/L6‑BA、10~20mg/L抗坏血酸和1mg/mL活性炭的NLN‑13培养基;(3)成熟胚萌发成植株:将胚状体至于1号培养基中进行振荡培养,将其中转绿的成熟胚转移到固体2号培养基中培育38‑50d,直接进行炼苗移栽;所述的固体2号培养基为添加0.02mg/L NAA、2mg/L 6‑BA、3%蔗糖和1.2%琼脂的1/2MS培养基。
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