[发明专利]一种无损伤巴布亚企鹅性别鉴定方法有效
| 申请号： | 201910222691.2 | 申请日： | 2019-03-22 |
| 公开（公告）号： | CN109897890B | 公开（公告）日： | 2022-06-03 |
| 发明（设计）人： | 刘卫东;田甲申;张胜久;鲍相渤;鹿志创;杜静;韩家波;李艳秋;刘明;刘有林;王京瑞 | 申请（专利权）人： | 辽宁省海洋水产科学研究院;大连圣亚旅游控股股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6848 | 分类号： | C12Q1/6848;C12Q1/6879;C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人： | 周媛媛;李馨 |
| 地址： | 116023 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种无损伤巴布亚企鹅性别鉴定方法，属于生命科学领域。本发明以被检巴布亚企鹅个体粪便为DNA来源，粪便在裂解液中裂解后，以粪便裂解液作为模板，利用发明的巴布亚企鹅性染色体引物进行巢式PCR扩增，得到长度差异显著的CHD‑W/CHD‑Z片段，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳，根据电泳结果判定被检企鹅性别。本发明具有对企鹅无损伤，准确性高并且操作简单等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 损伤 巴布亚 企鹅 性别 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
1.一种无损伤巴布亚企鹅性别鉴定方法，其特征在于包括如下步骤：(1)以被检巴布亚企鹅个体粪便为DNA来源，粪便在裂解液中裂解，所用裂解液组分体积百分比为6％‑8％蛋白酶K，0.4％‑0.6％吐温‑20，10％的10×Taq Buffer，余量为纯水；(2)以粪便裂解液作为模板1进行巢式PCR第一次扩增，再以第一次扩增得到扩增产物为模板2进行巢式PCR第二次扩增，得到特异性扩增产物；(3)将PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，根据电泳结果判定被检企鹅性别，若被检个体巢式PCR扩增产物为两条带则判断为雌性，一条带则判断性别为雄性；步骤(2)中所述的巢式PCR第一次扩增引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；步骤(2)中所述的巢式PCR第二次扩增引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。
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