[发明专利]一种驼乳乳清抗肿瘤活性蛋白及其制备方法和应用

摘要

本发明提供一种驼乳乳清抗肿瘤活性蛋白及其制备方法和应用，通过分离乳清蛋白采用超滤的方法获得，以新疆双峰驼乳清蛋白为研究对象，通过组分CM‑1，含有188种已知蛋白质，含有糖基化依赖性细胞粘附分子1、α‑乳白蛋白、肽聚糖识别蛋白1、维生素D结合蛋白、乳过氧化物酶、IgG‑Fc片段结合蛋白、14‑3‑3蛋白质、Igγ‑3C、乳铁蛋白、肌动蛋白、胺氧化酶、核连蛋白、泛素‑60s核糖体蛋白L4、RAS致癌基因家族成员等多种与肿瘤发生发展密切相关的蛋白质。实验表明，CM‑1对肿瘤细胞有明显抑制增殖作用，与化疗药物联合给药，抑制肿瘤细胞增殖的效果明显优于化疗药物单独给药，为肿瘤治疗提供一种多药联合方案，具有广泛的开发价值。

主权项

1.一种驼乳乳清抗肿瘤活性蛋白CM‑1，其特征在于，所述的抗肿瘤活性蛋白CM‑1具体制备方法如下：（1）驼乳样品过滤除杂，脱脂，收集脱脂乳，调节pH至4.6，于30‑80℃水浴加热10‑45min或放置过夜后，离心去除沉淀，收集上清液，调节pH至初始值，分离乳清蛋白，其中超滤法经截留分子量10KDa‑100KDa滤膜过滤，盐析法采用硫酸铵饱和度20%‑70%进行分级沉淀，经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，得到分子量大小在10KDa‑100KDa范围的抗肿瘤活性蛋白组分CM‑1，冻干备用；（2）聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白组分CM‑1蛋白质多态性将步骤（1）获得的冻干组分用12‑15%分离胶与5%浓缩胶进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，考马斯亮蓝R‑250染色，通过与已知分子量的蛋白质标准品比对，测定其分子量，保证每批样本蛋白质多态性一致。