[发明专利]一种利用基因组碱基编辑器系统生产FGF5基因编辑山羊的方法在审
| 申请号： | 201910234408.8 | 申请日： | 2019-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN109929878A | 公开（公告）日： | 2019-06-25 |
| 发明（设计）人： | 王小龙;李冠纬;周世卫;蔡蓓;陈玉林 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/90;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京久维律师事务所 11582 | 代理人： | 邢江峰 |
| 地址： | 712000 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用基因组碱基编辑器系统生产FGF5基因编辑山羊的方法，该方法包括以下步骤：构建特异性靶向FGF5第一外显子的sgRNA的体外转录载体；通过体外转录得到靶向FGF5第一外显子的sgRNA；体外转录BE3蛋白的体外转录载体，得到BE3 mRNA；将以上步骤的sgRNA及BE3 mRNA，纯化后混合，注射入山羊受精卵细胞质中，经体外培养后移植入同种雌性山羊输卵管中，用于生产FGF5基因敲除的基因编辑山羊。 | ||
| 搜索关键词： | 山羊 体外转录载体 第一外显子 体外转录 系统生产 编辑器 基因组 碱基 基因 输卵管 细胞质 山羊受精卵 特异性靶向 基因敲除 体外培养 靶向 构建 后移 植入 蛋白 注射 生产 | ||
【主权项】：
1.一种利用基因组碱基编辑器系统生产FGF5基因编辑山羊的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.构建特异性靶向FGF5第一外显子的sgRNA的体外转录载体；通过体外转录得到靶向FGF5第一外显子的sgRNA；S2.体外转录BE3蛋白的体外转录载体，得到BE3 mRNA；S3.将以上步骤的sgRNA及BE3 mRNA，纯化后混合，注射入山羊受精卵细胞质中，经体外培养后移植入同种雌性山羊输卵管中，用于生产FGF5基因敲除的基因编辑山羊。
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