[发明专利]一种血浆中α1微球蛋白的提取方法在审
| 申请号： | 201910257872.9 | 申请日： | 2019-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN109867717A | 公开（公告）日： | 2019-06-11 |
| 发明（设计）人： | 苏少博;裴朝红 | 申请（专利权）人： | 山西瑞亚力生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/22;C07K1/16 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 048100 山西省晋城*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种血浆中α1微球蛋白的提取方法，依次进行以下步骤制得，1）取α1微球蛋白免疫后的羊血浆，沉降后初步分离血细胞等多种物质；2）离心取上清，采用硫酸铵沉淀至溶液硫酸铵终饱和浓度达到33%（w/v）使血清充分沉淀；3）分离沉淀充分复溶，透析和浓缩；4）利用凝胶过滤层析柱对步骤3）处理过的滤液进行初步分离，收集含有α1微球蛋白的洗脱液；5）利用Protein G亲和层析柱对步骤4）收集到的洗脱液进行亲和层析，收集滤液进行除盐、浓缩处理后即得α1微球蛋白；6）利用SDS‑PAGE鉴定α1微球蛋白纯度。本方法步骤简单，安全性高，稳定性高且获得蛋白纯度较高，适合实验室及中试放大生产。 | ||
| 搜索关键词： | 微球蛋白 血浆 初步分离 洗脱液 凝胶过滤层析柱 硫酸铵 硫酸铵沉淀 亲和层析柱 蛋白纯度 放大生产 分离沉淀 浓缩处理 亲和层析 血细胞 沉降 血清 除盐 复溶 透析 沉淀 饱和 浓缩 | ||
【主权项】：
1.一种血浆中α1微球蛋白的提取方法，其特征在于，包含如下步骤：1）取α1微球蛋白抗原免疫后的新鲜羊血浆，待血液凝固后，取血浆离心除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出淡黄色透明液体‑血清；2）虹吸法吸出上层淡黄色透明液体，采用硫酸铵沉淀法使血清充分沉淀，离心分离沉淀，将沉淀复溶于缓冲液中，充分复溶后，进行透析，浓缩；3）凝胶过滤层析；4）Protein G亲和层析；5)SDS‑PAGE法鉴定α1微球蛋白纯度。
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