[发明专利]一种用于测定人循环血外泌体环状RNA的方法及其试剂盒在审
申请号: | 201910258172.1 | 申请日: | 2019-04-01 |
公开(公告)号: | CN109957621A | 公开(公告)日: | 2019-07-02 |
发明(设计)人: | 王红阳;李亮;危晏平;梁驰;任一彬 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军海军军医大学国家肝癌科学中心 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6851 |
代理公司: | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人: | 车超平 |
地址: | 201805 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种用于测定人循环血中外泌体环状RNA的方法及试剂盒,该方法包括:采集人静脉血,离心,收集血浆样本;对血浆样本进行外泌体分离及总RNA抽提,获得总RNA样品;测定RNA样品的浓度,并取适量的RNA样品进行逆转录反应,获得逆转录产物cDNA;采用如SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:2的扩增引物对逆转录产物cDNA进行PCR扩增,并根据扩增产物分析测定外泌体中环状RNA的含量。本发明还涉及一种人血清外泌体环状RNA Circ‑CDYL作为肝癌的诊断标记物的应用。本发明通过对人血浆外泌体分离及RNA抽提步骤的优化,并针对目的基因设计特异性引物,可从少量人血浆样本中分离外泌体,快速定量环状RNA的表达量,并可通过分析肿瘤等病人与健康人群的环状RNA的差异,用于肝癌的诊断和高危人群监测。 | ||
搜索关键词: | 环状RNA 逆转录产物 血浆样本 试剂盒 循环血 肝癌 扩增产物分析 逆转录反应 人血浆样本 特异性引物 诊断标记物 总RNA抽提 高危人群 健康人群 快速定量 扩增引物 目的基因 表达量 静脉血 人血浆 人血清 总RNA 肿瘤 采集 诊断 监测 应用 优化 分析 | ||
【主权项】:
1.一种用于测定人循环血样本外泌体环状RNA的试剂盒,其特征在于,包括如SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:2所示序列的扩增引物和如SEQ ID NO:3‑SEQ ID NO:4所示序列的内参引物。
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